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PREPARAÇÃO DA CUBA CROMATOGRÁFICA CONTENDO A FASE MÓVEL Utilizar uma proveta para medir os respectivos volumes Fluxograma - Cromatografia em camada delgada (CCD) Aluno: JONATAS ALAN ROCHA CARVALHO Turma: 01D Professora: MARAYLLA MORAES Preparar 50 mL de solução contendo 1,2 dicloroetanoetano/ ácido acético 12:1 (v/v). Transferir para uma cuba cromatográfica de 250mL Homogenizar com uma bagueta de vidro Separar igualmente em 3 cubas cromatográficas deixando saturar por 10 minutos. PREPARAÇÃO DOS PADRÕES Pesar 0,1 g de cafeína Utilizar um béquer de 25mL Solubilizar em 5 mL de mistura diclorometano/etanol 1:1 (v/v) (solução 1- caf) Transferir a solução para um frasco de 10 mL , tampar e rotular Pesar 0,1 g de ácido acetilsalicílico Ultilizar um béquer de 25 mL Solubilizar em 5 mL de mistura diclorometano/etanol 1:1 (v/v) (solução 2- asp) Transferir a solução para um frasco de 10 mL , tampar e rotular PREPARAÇÃO DO ANALITO Macerar um comprimido de analgesico em almofariz Transferir para um béquer de 25 mL Adicionar 5 mL de mistura diclorometano/etanol 1:1(v/v) Agitar a mistura com bagueta de vidro (rotular solução 3 analito) PREPARÇÃO DAS PLACAS CROMATOGRÁFICAS Placa cromatográfica: Placa de silica gel 60 com indicador de fluorescência UV254 e 0,2 mm de espessura Dividir cada placa de 5x10 cm em 5 faixas longitudinais Linhas feitas bem suavemente para não agredir a camada de sìlica APLICAÇÃO DOS PADRÕES E DO ANALITO NA PLACA Utilizar para a aplicação 1 cargas de capilar A 1 cm da base, aplicar, da esquerda para a direita as soluções Solução 1- caf. coluna 1 Solução 2- asp. coluna 2 Solução 3- analito coluna 3 As manchas aplicadas deverão ter no máx. 3 mm de diâmetro REVELAÇÃO DO CROMATOGRAMA, CÁLCULO DO Rf E DOCUMENTAÇÃO Após a placa secar, revelar o cromatograma na câmara de UV Documentar o cromatograma fotografando-o dentro da cuba de UV ou riscar o perímetro de cada mancha Posteriormente colocar a placa na cuba com vapores de iodo para a revelação por outro método e confirmar a revelação por UV Deverá ser realizado na capela Fluxograma Diagrama de propriedade de conta Fluxograma Diagrama de propriedade de conta Fluxograma Diagrama de propriedade de conta