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1 Aula 07 – Análise de Lipídios Totais Prof. Genilson de Paiva LIPÍDIOS DEFINIÇÃO: Compostos insolúveis em água e solúveis em solventes orgânicos FUNÇÕES: ❑ Principal fonte de armazenamento de energia para o ser humano ❑ Componentes das membranas celulares ❑ Fonte de ácidos graxos essenciais (ácido linoléico e linolênico) ❑ Responsável pelo sabor dos alimentos PRINCIPAIS CLASSES DE LIPÍDIOS: ❑ Triacilgliceróis ❑ Fosfolipídios ❑ Glicolipídios ❑ Esfingolipídios ❑ Lipoproteínas ❑ Ceras ❑ Vitaminas (A, D, E e K) ❑ Pigmentos ALIMENTO % DE LIPÍDIOS Manteiga / Margarina 81 Leite fresco 3,7 Leite em pó 27,5 Sorvetes 12 Cereais 3 – 5 Carne 16 – 25 Peixes 0,1 – 20 Ovos 12 Chocolate 35 Frutas 0,1 – 1 (abacate 26) Hortaliças 0,1 – 1,2 COMPOSIÇÃO LIPÍDICA DOS ALIMENTOS TRIACILGLICEROL ❑ Encontra-se em maior proporção nos alimentos (~90%). ❑ Apresenta-se na forma de óleos ou gorduras. ÓLEOS: triacilgiceróis que são líquidos à temperatura ambiente, devido à maior proporção de ácidos graxos insaturados. Maioria de origem vegetal. GORDURAS: triacilgiceróis que são sólidos à temperatura ambiente, devido à maior proporção de ácidos graxos saturados. Maioria de origem animal. PROPRIEDADES FÍSICAS DOS ÁCIDOS GRAXOS Depende do tamanho da cadeia carbônica e do número de insaturações. Ácidos graxos insaturados são mais fluídos Ácidos graxos saturados são mais densos 2 TRIACILGLICEROL ou TRIGLICERÍDEOS ❑ Formado por ésteres de ácidos graxos e glicerol. ÁCIDOS GRAXOS: ácidos monocarboxílicos de cadeia linear longa, saturados ou insaturados ÁCIDOS GRAXOS: são os principais componentes dos lipídios em alimentos, e responsáveis pelas diferenças entre lipídios de diferentes alimentos. Nos alimentos, em geral, predominam ácidos graxos: • Com número par de carbonos (16 e 18) • Configuração CIS • Ácidos graxos de 4 a 7 carbonos têm cheiro desagradável • Nos animais predominam ácidos graxos saturados (gordura) e nos vegetais insaturados (óleo). Exceto: gordura de coco e de babaçu; óleo de fígado de bacalhau • No processo de hidrogenação (margarinas) ácidos graxos insaturados tornam-se saturados. Ácido graxo Gordur a de gado Banha de porco leite de vaca leite human o Óleo de arengue Óleo de milho Manteig a de cacau Óleo de coco Óleo de palma Óleo de oliva 4:0 9 6:0 5 8:0 2 12 10:0 4 1 8 12:0 3 3 49 14:0 4 2 10 5 7 16 1 14:1 1 2 1 16:0 28 26 23 26 19 14 29 7 48 11 16:1 5 4 2 5 9 1 18:0 20 15 12 7 1 2 35 2 18:1 34 44 23 37 12 34 32 79 18:2 3 9 2 11 2 48 3 5 18:3 2 1 1 1 1 18:4 20:0 1 1 20:1 19 20:4 20:5 8 22:1 25 22:5 2 22:6 2 Composição de ácidos graxos de gorduras e óleos (%) MÉTODOS DE ANÁLISE DE LIPÍDIOS Determinação de lipídios totais: ❑ Método de Soxhlet ❑ Método Goldfish ❑ Método de bligh-dyer ❑ Método de Gerber Avaliação da qualidade de óleos e gorduras: ❑ Indice de acidez ❑ Indice de peróxido Caracterização de óleos e gorduras: ❑ Índice de iodo ❑ Indice saponificação ❑Método de Soxhlet: extração com éter etílico ou éter de petróleo. Método intermitente por refluxo. ❑Método Goldfish: extração com éter etílico ou éter de petróleo. Método contínuo, amostra em contato com solvente. ❑Método de bligh-dyer: extração a frio, com metanol, clorofórmio e água ❑Método de Gerber: específico para lipídios do leite e derivados. Emprega ácido sulfúrico e álcool isoamílico. MÉTODOS DE ANÁLISE DE LIPÍDIOS TOTAIS 3 MÉTODOS ANALÍTICOS 1 – Método de Soxhlet : Extração dos lipídios por solvente orgânico a quente, no extrator de Soxhlet. Mecanismo: arraste do lipídio com solvente (éter de petróleo ou éter etílico) por refluxo Ocorre em quatro etapas: ❑ Pesagem da amostra ❑ Extração da gordura com solvente (6 horas) ❑ Eliminação do solvente ❑ Quantificação (pesagem do lipídio extraído) Obs.: Amostra deve ser sólida e previamente seca, pois a presença de umidade, reduz eficiência de extração. 1 – Balão de fundo cheto 2 – Extrator de Soxhlet 3 - Condensador Equipamento: Extrator Soxhlet Equipamento: Extrator Soxhlet (Amostra) CÁLCULOS Determine a % de lipídios de uma amostra de batata ruffles, sabendo-se que amostra foi analisada em duplicata utilizando o método de Soxhlet, conforme resultados abaixo: Lipídios (g) Lipídios (%) 2- Método Goldfish • É um método que utiliza refluxo de solventes (éter de petróleo ou éter etílico) para extração de lipídios. • Processo de extração é contínuo, mais rápido • Amostras sólidas • Desvantagem do contato do solvente muito quente com a amostra, o que pode acarreta degradação da gordura. • Tem a vantagem de utilizar menos solvente e ser • mais rápido. Equipamento: Extrator Goldfish 4 2 - Método de Gerber: específico para leite e derivados ❑ Hidrólise da proteína e separação da gordura ❑ Centrifugação em butirômetro (tubo). A gordura do leite está em forma de emulsão de óleo e água, cercada por um filme de proteína. Amostra + Ácido sulfúrico (d = 1,82 g/mL): Hidrólise ácida + álcool isoamílico: facilita a separação da gordura e previne carbonização EQUIPAMENTOS PARA DOSAGEM DA GORDURA DE LEITE E DERIVADOS Centrífuga Bico de Papagaio Butirômetros Butirômetro EQUIPAMENTOS PARA DOSAGEM DA GORDURA DE LEITE E DERIVADOS Os lipídios podem se modificar nos alimentos durante: ❑ Armazenamento ❑ Processamento ❑ Uso em frituras Reações químicas dos lipídios em alimentos ❑ Rancidez hidrolítica (química, enzimática e microbiana) ❑ Rancidez oxidativa (reação com O2) ❑ Oxidação enzimática (matéria-prima) ❑ Hidrogenação (processamento) ❑ Isomerização (CIS para TRANS) ÍNDICE DE ACIDEZ (IA) Rancificação hidrolítica: ocorre devido à hidrólise da ligação éster: ❑ por lipases e umidade (ex.: deterioração de alimentos e qualidade de azeite) ❑ na presença de ácido ou base a temperatura elevada (ex.: fritura). Ocorre a formação de ácidos graxos livres: ÍNDICE DE ACIDEZ (IA) ❑ determina a % de ácidos graxos livres em relação ao ácido graxo predominante (g de ácido graxo/100 g de amostra) Método: neutralização da acidez da amostra com NaOH Dissolve-se a amostra em uma mistura de solventes (éter e álcool) + fenolftaleína, seguido de titulação com NaOH 0,1N. No eq NaOH = No eg de ac. Graxo N x V = mác. / PE ác. graxo