Biomedicina

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67Biomedicina na prática: 
da teoria à bancada SUMÁRIO
- Jaleco;
- Amostra de sangue em tubo com EDTA;
- Microscópio
Procedimentos:
1. Pipetar 3,98mL de solução fisiológica 0,85% em um tubo de ensaio;
2. Transferir 0,02mL de sangue para o tubo de ensaio limpando a parede externa da 
ponteira com um papel absorvente e lavando o interior da ponteira por aspiração e 
expulsão do líquido. Desta forma tem-se uma diluição de 1:200.
3. Agitar suavemente por inversão.
4. Com o auxílio de uma pipeta, preencher o retículo da câmara de Neubauer evitando o 
extravasamento de líquido e bolhas sob a lamínula aderida à câmara.
5. Deixar repousar por 2 minutos.
6. Observar em microscópio óptico com aumento de 400X.
7. Fazer a contagem de todas as hemácias encontradas nos quadrantes dos cantos e o 
central (ver figura abaixo).
Fonte: http://www.aa.med.br/upload/biblioteca/Manual%20de%20Hematologia.pdf
Cálculo: Hemácias por µL de sangue = hemácias x 5 x 10 x 200. 
Os resultados são em mm3.
Valores de Referência :
Homens: 4,5 a 5,5 milhões/mm3
Mulheres; 4,0 a 5,0 milhões/mm3
Recém-nascidos: 5,5 a 7,0 milhões/mm3
Dica: Valores aumentados são encontrados em policitemias e valores diminuídos em 
anemias. Esta prática oferece grande variabilidade de erros, sendo preferível a contagem em 
aparelhos automatizados.
http://www.aa.med.br/upload/biblioteca/Manual de Hematologia.pdf
68Biomedicina na prática: 
da teoria à bancada SUMÁRIO
2. PRÁTICA: Determinação do Microhematócrito
Esta prática serve para a determinação do volume ocupado pelas hemácias em um 
volume de sangue total. Valor expresso em percentual.
Materiais:
- Amostra sanguínea com EDTA;
- Agitador hematológico;
- Centrifuga de microhematócrito;
- Capilar de microhematócrito;
- Bico de Bunsen;
- Régua para microhematócrito;
- Luvas;
- Jaleco
Procedimentos:
1. Homogeneizar a amostra sanguínea em agitador hematológico por pelo menos 5 
minutos.
2. Preencher no mínimo 2/3 do capilar com o sangue homogeneizado.
3. Limpar o lado externo do capilar para não ficar resíduo de sangue.
4. Fechar uma das pontas do capilar com o auxílio do bico de Bunsen, confirmar se está 
corretamente fechada, invertendo o capilar. O sangue não poderá mover-se.
5. Colocar o capilar na centrifuga de microhematócrito com a ponta fechada voltada 
para a periferia da centrífuga.
6. Colocar os demais capilares, de tal forma que a centrifuga fique equilibrada;
7. Ligar a centrifuga e programa-la para centrifugar as amostras a 11.000 rpm durante 5 
minutos.
8. Efetuar a leitura das amostras na régua apropriada.
Valores de referência: Homens 40 a 52%, Mulheres 37 a 47%.
Índices hematológicos ou hematimétricos são determinados a partir da contagem 
global dos eritrócitos, taxa de hemoglobina e determinação do hematócrito. Tais elementos 
deverão ser padronizados pelo laboratório, fornecendo- se sempre resultados na unidade de 
percentagem do normal.
Temos:
1. Volume corpuscular médio (VCM): É o volume médio das hemácias expresso em 
fentolitros. Representa, portanto, o quociente de um determinado volume de hemácias 
pelo número de células contidas no mesmo volume. Calculado pela fórmula: 
 V.C.M. = Hematócrito x 10
      Eritócitos
2. Hemoglobina corpuscular média (HCM): É o conteúdo médio de hemoglobina nas 
hemácias expresso em picogramas. Representa, portanto, o quociente de conteúdo