Biomedicina

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71Biomedicina na prática: 
da teoria à bancada SUMÁRIO
de 110  fL. Geralmente presente no alcoolismo, uso de antiretrovirais como o AZT, anemia 
aplásica, doenças do fígado e esplenectomia e também na anemia megaloblástica.
Microcitose: É a diminuição do VCM abaixo de 80. Ela indica uma capacidade diminuída 
dos precursores das hemácias de produção de hemoglobina. Isto pode resultar de ferro 
insuficiente como na anemia ferropriva. 
Hipocromia: É a redução da coloração do eritrócito retratada com um aumento da 
palidez central, que ocupa a área superior ao terço do diâmetro do eritrócito. A hipocromia 
pode ser geral ou pode existir em algumas células do paciente. 
4. PRÁTICA: Contagem de reticulócitos
Os reticulócitos são células precursoras das hemácias, os quais apresentam em sua 
constituição uma ribonucleoproteína que não apresenta afinidade pelos corantes comuns. 
Este teste permite avaliar a produção dos glóbulos vermelhos. Em geral estão aumentados e 
situações como: drepanocitose, eritroblastose fetal, anemia aguda pós-hemorrágica, anemia 
hemolítica autoimune adquirida, hemoglobinúria paroxística noturna e resposta terapêutica 
satisfatória nas anemias carenciais. Dentre as causas de diminuição temos: anemia aplástica, 
crise aplástica de anemia hemolítica e anemias megaloblásticas.
Materiais:
- Amostra de sangue em tubo com EDTA;
- Pipeta automática 50μL;
- Ponteiras; 
- Banho Maria 37º C;
- Agitador hematológico;
- Lâminas;
- Luvas;
- Jaleco;
- Tubo vidro com tampa para diluição e homogenização;
- Capilar de microhematócrito;
- Microscópio;
- Corante Azul de Cresil brilhante
Procedimentos:
1. Homogeneizar a amostra sanguínea em agitador hematológico por pelo menos 5 
minutos.
2. Três gotas de sangue são misturadas com três gotas de azul de Cresil brilhante em um 
tubo.
3. Homogeneizar bem e incubar a 37º C durante 30 minutos. 
4. Retirar do banho-maria, homogeneizar bem e confeccionar extensões sanguíneas 
(esfregaços em lâmina)
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5. Observar ao microscópio óptico no aumento de 1.000X com óleo de imersão e contar 
em pelo menos 10 campos com 100 eritrócitos, anotando o número de reticulócitos 
contados. Calcular a porcentagem de reticulócitos para expressar o resultado.
Número de Reticulócitos em 10 campos = % de reticulócitos
        10
Dica: Se houver necessidade a lâmina pode ser corada com o corante usual da 
hematologia, melhorando a visualização. Valores de referência: entre 0,5 e 1,5%
5. PRÁTICA: Velocidade de Hemossedimentação (VHS)
Avaliação do grau de sedimentação espontânea dos glóbulos vermelhos em uma 
amostra de sangue durante um período estabelecido de tempo. Auxilia na indicação de 
doenças inflamatórias e malignas. O princípio se baseia no fato que como o plasma é menos 
denso, favorece a sedimentação dos glóbulos pela ação da gravidade, quando colocados 
numa pipeta graduada chamada de pipeta de Westergren. 
A sedimentação possui velocidade variável em função da concentração de proteínas 
plasmáticas, do tamanho e forma das hemácias e alterações elétricas do plasma e dos 
glóbulos. É um teste de laboratório usado rotineiramente, simples e de baixo custo geralmente 
empregado como marcador de resposta inflamatória. Todavia, o exame apresenta à baixa 
sensibilidade e especificidade para o diagnóstico preciso, devendo ser associado a outros 
parâmetros e exames. 
Materiais:
- Amostra de sangue em tubo com EDTA;
- Pipeta de Westergren;
- Agitador hematológico;
- Lâminas;
- Luvas;
- Jaleco;
- Cronômetro
Procedimentos: 
1. Amostra de 5 mL de sangue em frasco com EDTA. Note: o sangue deve ser coletado em 
jejum de pelo menos 8h. 
2. Agitar o tubo; 
3. Com pipeta de Westergren aspirar sangue até exatamente a marca zero.
4. Colocar a pipeta no suporte de modo a permanecer na posição vertical
5. Marcar o tempo no cronômetro (60 minutos).
6. Realizar a leitura em milímetros após o tempo esgotado, ao nível da separação do 
plasma e hemácias.
Valores de referência: 
> 50 anos: Homens até 15 mm/hora, mulheres até 20 mm/hora.