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Débora Marroni
Eduardo Germano
Professora: LUCIENNE FRANÇA REIS PAIVA
Turno: MANHÃ
Curso: FARMÁCIA
DISCIPLINA: MICROBIOLOGIA CLÍNICA 2021.1 
ATIVIDADE 6
ORIENTAÇÕES
Este exercício pode ser realizado em grupo (preferencialmente) ou
individualmente.
Para ser enviado até 22/06/2021 pelo e-mail: luciennefranca@gmail.com
Para realizá-lo além de aulas teóricas (slides), livros, dentre outros,
consultarem a apostila de aula prática 9.
REFERENTE ÀS AULAS ONLINE E VÍDEOS-AULAS DE “METODOLOGIA E
INTERPRETAÇÃO DOS PRINCIPAIS TESTES DE SUSCEPTIBILIDADE AOS
ANTIMICROBIANOS E PADRONIZAÇÃO BRCAST (BRAZILIAN COMMITTEE ON
ANTIMICROBIAL SUSCEPTIBILITY TESTING) E “TESTE DE SUSCEPTIBILIDADE AOS
ANTIMICROBIANOS – DIFUSÃO DE DISCOS (KIRBY-BAUER)”. PARA FIXAÇÃO DO
APRENDIZADO E PONTUAÇÃO DE A2.
mailto:luciennefranca@gmail.com
Reprodutibilidade aceitável entre bateladas.
Níveis baixos de inibidores de sulfonamidas, trimetoprim e tetraciclinas.
Crescimento satisfatório da maioria dos patógenos não exigentes.
Vasta experiência prática e científica acumulada.
Preparar o meio a partir de uma base desidratada comercial de acordo com instruções do fabricante. Concentração
de ágar, concentração de íons no ágar, e características nutritivas devem ser garantidas pelo fabricante.
Controle rigoroso do pH. O pH final pós-preparo deve estar entre 7,2 – 7,4.
Controle da umidade.
A altura da camada do ágar depositado na placa de Petri deve ser de 4 ± 0,5 mm. A uniformidade e o tamanho de
espessura são importantes, pois garantem a adequada difusão do antibiótico no ágar.
Testes de cepas controle e teste de esterilidade devem ser feitos em cada lote de meio preparo.
A temperatura de incubação deve ser rigorosamente entre 35 ± 1° C (consultar tabela do documento), sem atmosfera
de CO2, para também se garantir a adequada difusão da droga do meio.
1. Antibiograma é um ensaio que mede a sensibilidade ou resistência de uma bactéria aos antibióticos através
do espectro de susceptibilidade identificados na placa de cultura. Assinale a alternativa que apresenta o meio
de cultura utilizado para a realização do teste de avaliação da resistência aos antimicrobianos pelos métodos
de difusão em disco e E-test para enterobactérias, não fermentadores, Staphylococcus, Enterococcus spp.
a) Caldo Selenito
b) Meio Ágar Müeller Hilton
c) Meio Ágar Citrato Simmons
d) Meio Ágar Sabouraud
e) Meio Ágar TSI – triplo açúcar ferro
2. Em relação ao antibiograma pelo método de Kirby-Bauer, indique em que consiste o método utilizado, o meio
de cultura padronizado pelo BrCAST e as principais considerações sobre o inóculo.
Resposta: É um método que oferece resultados qualitativos, ou seja, o micro-organismo é avaliado como sensível (S),
intermediário – sensível aumentando exposição (I) ou resistente (R) aos diferentes antimicrobianos testados, de constante
padronização e de custo razoável, razão pela qual é mais utilizado nos laboratórios de Microbiologia.
Dentre os meios de cultura disponíveis, o BrCast considera o Ágar Mueller-Hinton o melhor para uso rotineiro pelos
seguintes motivos:
Para garantir essas qualidades do ágar Mueller-Hinton, deve-se observar alguns itens:
3. A sensibilidade dos micro-organismos à ação das drogas antimicrobianas pode ser determinada in vitro por
meio de antibiograma. Utiliza-se o teste para verificação do efeito bactericida e bacteriostático, bem como
para a demonstração das drogas que exercem esse efeito. Em relação ao Teste de Diluição em Caldo de
Cultura para determinação da susceptibilidade microbiana às drogas, é INCORRETO afirmar que:
a) é utilizada de uma série de tubos contendo diferentes concentrações conhecidas do agente antimicrobiano. 
b) a mesma concentração do inóculo bacteriano é adicionada nos tubos. 
c) a etapa de incubação é essencial para realização da leitura do teste. 
d) pela leitura é determinada a concentração inibitória mínima (CIM ou MIC). 
e) a CIM ou MIC é definida como a menor concentração de agente antimicrobiano que ainda apresenta crescimento
visível. 
4. Considerando-se a complexidade dos processos infecciosos, desde a problemática do estabelecimento de
sua etiologia até a dificuldade de implantação da opção terapêutica mais adequada, o suporte laboratorial é
de suma importância para a adoção das estratégias mais adequadas, visando à recuperação do paciente e à
prevenção de eventos alarmantes de saúde pública, como a potencialização global da resistência microbiana.
Sob essa ótica, o Teste de Sensibilidade aos Antimicrobianos (TSA) torna-se imprescindível. Com base nos
parâmetros de fundamentação, realização e interpretação desse teste, analise as afirmativas abaixo e assinale
a opção CORRETA.
a) Permite determinar a Concentração Inibitória Mínima (CIM) do antimicrobiano por meio dos métodos de
Etest® e pelo preconizado por Kirby -Bauer. 
b) Existe padronização realizada pelo BrCAST (Brazilian Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing) para todas as
bactérias isoladas e independentes, inclusive, do número obtido na quantificação, quando prevista. 
c) Pode ser realizado empregando-se diferentes meios de cultura, sendo um deles o Ágar MacConkey. 
d) Inóculo fora do padrão, características e espessura do meio de cultura e tempo e atmosfera de incubação podem
alterar o resultado do teste. 
e) A CIM pode ser calculada pelo diâmetro do halo de inibição com base em tabelas do BrCAST que fazem a correlação
entre o halo em mm e a CIM em mg/mL.
5. Cada uma das seguintes afirmativas com respeito à realização do antibiograma está correta, mas uma delas
está incorreta. Assinale a afirmativa INCORRETA:
a) O ágar Mueller-Hinton é o meio padronizado para a realização do antibiograma.
b) A presença de qualquer halo de inibição indica sensibilidade da cepa testada ao antibiótico ou ao quimioterápico do
disco.
c) Não se comparam halos de inibição de antibióticos diferentes.
d) O antibiograma de bactérias exigentes como espécies de estreptococos, deve ser realizado em Ágar Mueller-Hinton,
acrescido de 5% de sangue desfibrinado de cavalo.
6. A ESBL - β – lactamase de espectro estendido - é:
a) organela constituinte da célula bacteriana
b) enzima que confere resistência a algumas bactérias
c) antimicrobiano testado para Bastonetes Gram negativos
d) fator de crescimento de Escherichia coli
e) as respostas a e d são corretas.
7. Paciente do sexo masculino 50 anos, após uma semana no leito de uma unidade de terapia intensiva, seu
médico suspeita de uma septicemia. Na cultura de sangue, o micro-organismo isolado foi Klebsiella
pneumoniae produtora de ESBL. Quais dos antimicrobianos abaixo seriam reportados a resistência?
a) Meropenem, imipenem e ertapenem.
b) Penicilinas, cefalosporinas e monobactan (aztreonam).
c) Carbapenêmicos e imipenem.
d) Meropenen e penicilina.
e) Penicilina, amicacina.
8. Segundo a padronização do BrCAST para o teste de susceptibilidade aos antimicrobianos é correto afirmar,
EXCETO, portanto assinale a questão INCORRETA:
a) o meio de cultura a ser utilizado é o Ágar Mueller-Hinton para a maioria dos micro-organismos
b) o máximo de discos a ser colocado em uma placa de 150 mm é de 12 discos
c) o inóculo deve obedecer ao padrão de turvação da escala 0,5 de MacFarland
d) o método de Kirby-Bauer fornece resultados qualitativos
e) o método do E-test não é usado rotineiramente por ser impreciso, não reprodutível
9. Staphylococcus aureus MRSA, resistentes à oxacilina, são diagnosticados laboratorialmente analisando o
perfil de resistência em cultura dos discos de:
a) Novobiocina 
b) Oxacilina 
c) Cefoxitina 
d) Vancomicina 
e) Cefotaxima
10. Se um clínico receber um resultado de antibiograma de Staphylococcus apresentando resistência à
eritromicina e sensibilidade à clindamicina espera-se que o Laboratório de Microbiologia tenha realizado qual
teste para certeza da real sensibilidade da clindamicina:
a) Teste de ESBL 
b) D-teste 
c) Pesquisa de KPC 
d) Pesquisa de AmpC
e) Teste de Hodge modificado
11. A sensibilidade dos micro-organismos à ação das drogas antimicrobianas podeser determinada in vitro por
meio de antibiograma. Utiliza-se o teste para verificação do efeito bactericida e bacteriostático, bem como
para a demonstração das drogas que exercem esse efeito. Sobre os antibiogramas identifique as afirmativas
abaixo em verdadeiras (V) ou falsas (F).
( V ) O antibiograma dado como qualitativo é feito por método de difusão. 
( F ) Não há diferença de métodos empregados nos antibiogramas qualitativo e quantitativo. 
( V ) O antibiograma dado como quantitativo é feito por método de diluição. 
( V ) O método quantitativo é capaz de determinar a Concentração Inibitória Mínima (CIM) para um determinado micro-
organismo. 
( F ) A diferença entre os antibiogramas qualitativo e quantitativo se dá unicamente pelo custo e material empregado. 
A sequência correta é: 
a) V, F, V, V, F 
b) V, V, V, F, F 
c) F, F, V, V, F 
d) F, V, F, F, V 
e) V, F, V, F, V
12. Certas bactérias são ESBL positivas, ou seja, produzem betalactamase de espectro estendido, conferindo à
bactéria resistência às penicilinas, cefalosporinas e aztreonam. Esta característica ocorre nas seguintes
bactérias, EXCETO, portanto assinale a opção INCORRETA:
a) Klebsiella oxytoca
b) Klebsiella pneumoniae
c) Escherichia coli
d) Staphylococcus saprophyticus
e) Outras enterobactérias
13. Marque F (Falso) ou V (Verdadeiro): 
( V ) ESBL, KPC e AmpC são tipos de enzima betalactamase que podem ser produzidas pelas Enterobactérias.
( V ) A resistência a Vancomicina para Staphylococcus aureus e Enterococcusdeve ser confirmada sempre por métodos
quantitativos.
( V ) Um inóculo pesado – turvação superior a escala 0,5 Mac Farland traduz uma resistência falsa no antibiograma.
( F ) Para realizar o antibiograma não é necessário estar com a bactéria pura.
14. O antibiograma apresenta como objetivos a identificação e a análise do perfil e da sensibilidade de
bactérias isoladas a um painel de antibióticos. Esse exame é realizado em culturas de material obtido em
diversas áreas do organismo que tenham apresentado crescimento bacteriano. Existe também a possibilidade
de utilização do antibiograma automatizado, que fornece a concentração inibitória mínima de antibiótico para
determinada bactéria. Na realização do antibiograma podemos afirmar que:
a) por difusão de discos, caso ocorra crescimento de bactérias hemolíticas, a leitura deve ser realizada na zona de
hemólise, selecionando-se a área de maior lise.
b) por difusão de discos, todo crescimento no halo de inibição deve ser ignorado, não sendo tais bactérias subcultivadas. 
c) por difusão de discos, após inoculação e período de incubação, devem ser checados a característica do
crescimento e o padrão das zonas de inibição ao redor dos discos, usando-se um paquímetro ou halômetro ou
régua. 
d) automatizado, o inóculo deverá ser preparado a partir de colônias confluentes para que sejam levados em conjunto
todos os agentes que cresceram na placa de isolamento primário. 
e) automatizado, a grande desvantagem se relaciona à impossibilidade de uma abordagem quantitativa da sensibilidade
dos micro-organismos isolados.
15. Com relação aos testes de sensibilidade aos antimicrobianos, considere as seguintes afirmativas:
1. Para antibiograma pelo método de difusão de discos em ágar, o inóculo bacteriano deve ser realizado a partir de uma
suspensão bacteriana padronizada, como na escala 1,5 de McFarland.
2. O antibiograma por métodos de diluição tem como objetivo determinar a concentração do antimicrobiano que inibe
visivelmente o crescimento bacteriano.
3. A concentração inibitória mínima é a menor concentração de um antimicrobiano que elimina totalmente os micro-
organismos.
4. Antibiograma pelo método da difusão de discos, segundo Kirby-Bauer, tem como objetivo avaliar quantitativamente a
concentração bactericida de um antimicrobiano.
5. O método de microdiluição em caldo é o teste recomendado quando se deseja um resultado qualitativo.
Assinale a alternativa CORRETA.
a) Somente a afirmativa 2 é verdadeira.
b) Somente as afirmativas 1, 2 e 3 são verdadeiras.
c) Somente as afirmativas 1, 4 e 5 são verdadeiras.
d) Somente as afirmativas 2, 3, 4 e 5 são verdadeiras.
e) Somente as afirmativas 1, 3, 4 e 5 são verdadeiras.
16. A determinação da susceptibilidade aos antimicrobianos (TSA ou antibiograma) é uma das principais
tarefas do laboratório de microbiologia clínica, o que exige execução cuidadosa. Sobre esse assunto, analise
as afirmativas abaixo:
I. Quando as enterobactérias são produtoras da enzima ESBL são resistentes à todas as penicilinas e cefalosporinas, mas
não aos carbapenêmicos.
II. O teste de antibiograma por difusão de discos fornece uma avaliação quantitativa (Concentração Inibitória Mínima –
CIM) da susceptibilidade aos antimicrobianos.
III. Os sistemas automatizados têm a vantagem de avaliar todas as diluições de cada antimicrobiano, utilizando os pontos
de corte específicos para a categorização da CIM (Concentração Inibitória Mínima).
IV. O pH do meio de Mueller Hinton deve estar entre 7,2 e 7,4, e sua espessura, quando distribuído em placas de Petri,
deve ser de aproximadamente 4 mm.
Assinale a alternativa CORRETA.
a) I e III estão corretas
b) I e IV estão incorretas
c) II e III estão corretas
d) II e IV estão incorretas
e) I e IV estão corretas.