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HISTOLOGIA 1. Identificar no microscópio os componentes mecânicos e ópticos e aprender o microscópio. O MICROSCÓPIO O microscópio óptico ou de luz compõe-se de uma parte mecânica e uma parte óptica, constituída por 3 sistemas de lentes: o condensador, as objetivas e as oculares. A finalidade do condensador é projetar um cone de luz sobre as células e tecidos que estão sendo examinados. Após atravessá-los, o feixe luminoso em forma de cone penetra na objetiva. A objetiva projeta uma imagem aumentada, no plano focal da ocular, que novamente a amplia. Por fim, a imagem fornecida pela ocular pode ser percebida pela retina do observador como imagem situada a 25 cm da ocular. Cada microscópio possui 2 ou 3 objetivas chamadas secas; de pequeno, médio e grande aumento. De modo geral, as objetivas secas são parafocais, isto é, se o objeto está focalizado com uma, estará muito perto de sê-lo com as outras. Uma outra objetiva, denominada de imersão, possibilita um aumento de 100X. Essa objetiva é usada com óleo de cedro, cujo índice de refração é maior que o do ar, permitindo um melhor aproveitamento dos raios luminosos que incidem sobre o corte e, consequentemente, uma imagem de qualidade superior. Cálculo do Aumento: A ampliação total é obtida multiplicando-se o aumento da objetiva (vem gravado na mesma), pelo aumento da ocular (também gravado). Assim, utilizando-se uma objetiva de 40x e uma ocular de 10x, a imagem observada estará aumentada 400x. As imagens microscópicas podem ser aumentadas quase que indefinidamente pelos meios ópticos e fotográficos; mas acima de certo limite a imagem aparece muito embaçada e jamais é melhorada com aumento complementar. Daí os microscópios de luz, raramente serem usados com aumentos maiores de 1000x. : Resolução é a capacidade que um sistema óptico ou eletrônico Limite de Resolução possui de poder visualizar dois pontos separados por uma certa distância. O limite de resolução corresponde à menor distância existente entre dois pontos, o que permite que eles sejam observados individualmente. Por exemplo: duas partículas separadas por 0,3 m aparecem individualizadas em um sistema óptico com limite resolutivo de 0,2 m. A riqueza de detalhes da imagem fornecida por um sistema óptico depende do seu limite de resolução (poder de resolução) e não do seu poder de aumentar o tamanho dos objetos. Como usar o microscópio: a) Acenda a lâmpada do microscópio. Obs.: nunca ligue a luz do microscópio sem que a fonte de luz esteja zerada, pois isto poderá queimar a lâmpada. b) Usando um lenço de papel (nunca o algodão), limpe a lâmina que você vai analisar as objetivas e as oculares. c) Gire o revólver do microscópio de modo que a objetiva de menor aumento fique em posição de uso. d) Coloque a lâmina a ser observada sobre a platina estando a lamínula voltada para cima. e) Focalize o objeto usando inicialmente o parafuso macrométrico; este parafuso deve ser movido lentamente a fim de evitar que a objetiva atinja a lâmina, quebrando-a. f) Melhore o foco usando o parafuso micrométrico. g) Centre a estrutura que você quer examinar, usando para isto o sistema “charriot”. h) Gire o revólver e mude para uma objetiva de maior aumento, com cuidado para que a mesma não atinja a lâmina ou quebre a lamínula. Ajuste o foco, utilizando somente o parafuso micrométrico. i) Se for necessário, abaixe ou eleve o condensador, abra ou feche o diagrama, para obtenção da melhor imagem possível. j) No exame de preparações permanentes, o diafragma, geralmente, funciona totalmente aberto. k) Existe um parafuso para regular a distância entre o condensador e a platina e um dispositivo para aumentar ou diminuir a abertura do diafragma. l) Para cada lâmina que for examinada durante o curso, repita a mesma orientação. Cuidados com o Microscópio O microscópio é um aparelho de precisão feito de um material valioso. Havendo cuidado por parte de quem o usa, ele durará longo tempo, mas, um pouco de negligência poderá danificá-lo de maneira permanente. Quando não estiver sendo usado, o microscópio deverá ficar coberto, ao abrigo da poeira. O que não deverá ser feito: a) Deixar acesa a lâmpada do microscópio quando não estiver sendo usado. b) Mergulhar as objetivas em líquidos para limpá-las. Isto poderá danificá-las permanentemente. c) Focalizar, girando as objetivas de maior aumento para baixo, a fim de evitar que a lâmina ou lamínula sejam quebradas. d) Tentar fazer consertos em seu microscópio. Isso exige pessoa qualificada. e) Mover o microscópio de um lugar para outro do laboratório. Se precisar de auxílio, a professora ou o técnico deverá ir até o seu microscópio. f) Tentar desmontar as oculares e as objetivas. 1. base ou pé; 2. fonte de luz; 3. parafusos macro e micrométrico; 4. haste ou braço; 5. lente condensadora ou condensador; 6. mesa ou platina; 7. charriot; 8. lentes objetivas; 9. revólver das objetivas 10. tubo ou canhão 11. lente ocular (CARVALHO e RECCO-PIMENTEL, 2001). Partes mecânicas do microscópio: 1 – Descrever os aspectos histofisiológicos do TECIDO EPITELIAL DE REVESTIMENTO. 2 – Identificar nas lâminas histológicas os diferentes tipos de epitélios, de acordo com o número de camadas e forma das células: Descrever os aspectos histofisiológicos do TECIDO EPITELIAL GLANDULAR. 3 – 4 - Identificar nas lâminas histológicas os diferentes tipos de glândulas existentes 1 - Descrever os aspectos histofisiológicos do TECIDO CONJUNTIVO. 2 - Identificar na lâmina histológica: a) Fibroblasto b) Fibrócito c) Plasmócito d) Macrófago e) Mastócito 1 – Caracterizar o Tecido Conjuntivo propriamente dito: 1 - Identificar na lâmina histológica o tecido conjuntivo adiposo: a) Unilocular b) Multi locular