Biomedicina

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13Biomedicina na prática: 
da teoria à bancada SUMÁRIO
- Agulha hipodérmica descartável;
- Conta-gotas;
- Água destilada;
- Soro fisiológico (NaCl 0,9%):
- Solução hipertônica (solução saturada de NaCl e/ou açúcar):
- Microscópio óptico;
- Luvas descartáveis.
Procedimentos:
1. Fazer um pequeno furo na ponta do dedo com a utilização de uma agulha hipodérmica 
descartável e colocar uma gota de sangue sobre três lâminas.
2. Pingar soro fisiológico em uma das lâminas caso a gota de sangue não apresente um 
volume grande. 
3. Cobrir com a lamínula e observar ao microscópio.
4. Na segunda lâmina, pingar uma gota de solução hipertônica sobre a gota de sangue. 
5. Cobrir com a lamínula e observar ao microscópio as hemácias “murchas”, ficando 
crenadas.
6. Na terceira lâmina, pingar uma gota de solução hipotônica (água destilada) sobre a 
gota de sangue. 
7. Cobrir com a lamínula e observar ao microscópio as hemácias com aumento do 
tamanho, ficando túrgidas e podendo ser visualizada algumas células “estouradas”.
5. PRÁTICA: Observação de mitose em ponta de raiz de cebola Allium cepa 
(2n = 16)
Materiais:
- Cebola;
- Becker;
- Água;
- Estilete;
- Álcool:
- Ácido Acético;
- Álcool 70%;
- Ácido Clorídrico 1N;
- Papel absorvente;
- Lâmina;
- Lamínula;
- Corante.
14Biomedicina na prática: 
da teoria à bancada SUMÁRIO
Procedimentos:
1. Encher um frasco com água e colocar a cebola com a parte das raízes imersa na água 
e esperar até que as raízes comecem a crescer. Isto pode levar entre 24h e alguns dias.
2. Quando as raízes atingirem pelo menos cinco milímetros poderão ser facilmente 
destacadas do bulbo com auxílio de um estilete. Não é necessário o crescimento 
excessivo da raiz, pois o material necessário se encontra na ponta da mesma.
3. As pontas da raiz devem ser imediatamente fixadas em solução de álcool e ácido 
acético (3:1). Esta solução deve ser preparada no momento de uso. As raízes devem 
ficar em torno de 2 horas nesta solução fixadora.
4. Após o tempo de imersão no fixador, as pontas de raiz podem ser estocadas em álcool 
70% em refrigerador ou então preparadas para a observação das mitoses.
5. O material fixado deve ser hidrolisado. Transferir as pontas de raiz de cebola para 
uma solução de ácido clorídrico 1N e deixar em imersão por 15 minutos. 
6. Lavar em água (imersão por um ou dois minutos).
7. Remover o excesso de água com um papel absorvente e transferir para uma lâmina de 
microscopia.
8. Antes de adicionar o corante sobre a ponta da raiz, pode-se remover ou romper com 
uma agulha as extremidades do material, correspondendo à região da coifa, pois isso 
facilitará a coloração e observação ao microscópio.
9. Para a coloração, pode ser utilizado o corante orceína acética 2%, pingando uma gota 
sobre a lâmina e aguardar cerca de 20 minutos.
10. Colocar a lamínula cuidando para que não fiquem bolhas de ar.
11. Envolver a lâmina com um papel filtro e pressionar com o dedo polegar a lamínula, 
fazendo com que o tecido se espalhe pela lâmina e seja possível observar camadas 
de células isoladas. 
Dica: Deve-se cuidar para não colocar muito tecido sobre a lâmina, pois isto dificultará a 
visualização da mitose. Cerca de 2mm de ponta de raiz são suficientes.
Dica: O material também pode ser espalhado segurando a lamínula com um papel 
absorvente e bater com um lápis borracha ou com a tampa de caneta.
12. Após, a lâmina pode ser observada em microscópio em menor aumento (100x) para 
que se localize rapidamente onde estão as células em divisão e posteriormente se 
necessário analisar em aumento de 400x.
Referências
DE ROBERTIS, E.D.P., DE ROBERTIS, E.M.F. Bases da Biologia Celular e Molecular. 3a ed. Rio de 
Janeiro: Guanabara Koogan, 2000.
LORETO, E.L.S. & SEPEL, L.M.N. Atividades experimentais e didáticas de Biologia Molecular e 
Celular. Ribeirão Preto, ed. Da Sociedade Brasileira de Genética. 2003. 2a ed.
JORDÃO, B.Q. et al. Práticas de Biologia Celular. Londrina, Editora UEL, 1998.