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Ed
Vamos analisar cada afirmação sobre o método de sequenciamento de DNA proposto por Fred Sanger: ( ) A leitura, e interpretação dos resultados do sequenciamento manual é realizado por meio da eletroforese horizontal realizada em gel de agarose, como na PCR convencional. Verdadeiro (V). A leitura manual dos resultados do sequenciamento é feita por eletroforese horizontal em gel de agarose, onde as bandas de DNA são separadas de acordo com o tamanho das moléculas. ( ) Os ddNTP’s não possuem o grupo OH livre do carbono 3’ da pentose, fato que impede a ligação fosfodiéster com o nucleotídeo seguinte. Verdadeiro (V). Os ddNTPs são nucleotídeos modificados que não possuem o grupo OH livre no carbono 3', o que impede a formação da ligação fosfodiéster com o próximo nucleotídeo, atuando como terminadores da cadeia de DNA. ( ) Os ddNTP’s agem como um truncador da cadeia de DNA que está sendo sintetizada. Falso (F). Os ddNTPs atuam como terminadores da cadeia de DNA, não como truncadores, pois impedem a adição do próximo nucleotídeo na síntese. ( ) A leitura, e interpretação dos resultados do sequenciamento automatizado é realizado por meio da eletroforese capilar que, após a sua leitura pelo sistema de captura, resulta no Eletroferograma. Falso (F). A leitura e interpretação dos resultados do sequenciamento automatizado são feitos por eletroforese capilar, mas o resultado é apresentado em um cromatograma, não em um eletroferograma. Portanto, a sequência correta é: a) F-V-V-F.
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