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A grande vantagem da utilização do RNA-seq é que, nesta tecnologia, não é necessário que se tenha prévio conhecimento do genoma ou dos transcritos ...

A grande vantagem da utilização do RNA-seq é que, nesta tecnologia, não é necessário que se tenha prévio conhecimento do genoma ou dos transcritos que serão avaliados. Algumas das aplicações relacionadas a essa técnica são: a avaliação da expressão gênica diferencial, análise do perfil do transcriptoma e a investigação de SNPs. Com base nas etapas para do método da transcriptoma RNA-seq, ordene os itens a seguir:

I- Fragmentar as moléculas por ação de enzimas de restrição, sonicação ou nebulização, formando fragmentos que serão ligados a adaptadores (pequenas sequências de nucleotídeos que indicam onde o sequenciamento deve ser iniciado em cada molécula).
II- Isolar e fragmentar o RNA a ser sequenciado e convertê-lo em cDNA.
III- Aplicar métodos de sequenciamento para sequenciar pequenas porções, compostas por 30 a 200 pb (pares de bases), de cada um dos fragmentos.

Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:

A I - III - II.
B II - III - I.
C II - I - III.
D I - II - III.

Essa pergunta também está no material:

Avaliação II - Individual
6 pág.

Biologia Molecular UniasselviUniasselvi

Respostas

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Vamos analisar a ordem correta das etapas para o método da transcriptoma RNA-seq: I- Fragmentar as moléculas por ação de enzimas de restrição, sonicação ou nebulização, formando fragmentos que serão ligados a adaptadores (pequenas sequências de nucleotídeos que indicam onde o sequenciamento deve ser iniciado em cada molécula). Esta etapa ocorre antes do sequenciamento propriamente dito, preparando as moléculas para o processo. II- Isolar e fragmentar o RNA a ser sequenciado e convertê-lo em cDNA. Essa etapa envolve a preparação do RNA para o sequenciamento, convertendo-o em cDNA para facilitar a análise. III- Aplicar métodos de sequenciamento para sequenciar pequenas porções, compostas por 30 a 200 pb (pares de bases), de cada um dos fragmentos. Nesta etapa, os fragmentos preparados são sequenciados para obter as informações sobre o transcriptoma. A sequência correta das etapas é: D) I - II - III.

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