Apostila Microbiologia Aluna Luryan Caroline Ferreira, Odontologia Noturno.

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TÓPICO 1 
Para fornecer um diagnóstico microbiológico é 
necessário conhecer as características morfológicas e 
morfotintoriais de uma bactéria. 
 As bactérias são seres microscópicos unicelulares e 
procariontes, ou seja, possui somente uma célula com 
seu material genético disperso no citoplasma, sem 
organização celular. Além disso ela possui várias 
organelas que são responsáveis por papeis fisiológicos 
diferentes na manutenção de seu organismo. Um 
exemplo de organela bacteriana são as fímbrias, que 
são responsáveis pela sua adesão nas nossas mucosas. 
As bactérias possuem uma parede celular que é 
localizada externamente a membrana plasmática, e 
tem como principal função garantir proteção e forma 
da célula. Já os flagelos são responsáveis pela 
locomoção da bactéria. 
 
 
 Tipos morfológicos 
 A morfologia da célula bacteriana é classificada de 
acordo com seu tamanho (microscópica), forma e 
arranjo.. e se apresentam sob três tipos morfológicos 
fundamentais, : 
 Pequenas esferas redondas- COCOS. 
 Bastonetes retos- BACILOS 
 Bastonetes encurvados- ESPIRILOS 
 
 
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 COCOS: 
Os cocos são células redondas que tomam 
denominações diferentes de acordo com seu 
agrupamento: 
Quando agrupados aos pares são chamados de 
Diplococos. 
Quando agrupado em cadeias, Estreptococos. 
Quando agrupados de formas irregulares, 
Estafilococos.. 
 
 
PERGUNTAS TÓPICO 1 
1) Como se encontra o rearranjo estrutural dos 
diplococos, estreptococos e estafilococos ? 
Os Diplococos encontram-se agrupados aos pares, 
Os Estreptococos encontram-se agrupados em 
cadeias 
Os Estafilococos encontram-se agrupados de 
formas irregulares 
 
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2) Quais as funções das respectivas organelas 
presentes nas bactérias: Flagelo e Fímbrias: 
Os flagelos tem como função dar mobilidade ás 
bactérias além de servir como um sensor 
mecânico, que decteta alterações no ambiente. Já 
as fimbrias tem como função fixar as bactérias 
aos substratos, em outras células, e nos nossos 
tecidos. 
 
TÓPICO 2 
 
 
 
O método de coloração de Ziehl-Neelsen é utilizado 
para a detecção dos BAAR (bacilos álcool-ácido-
resistentes). A alta concentração de ácidos micólicos 
em sua parede celular, faz com que a estrutura 
dessas bactérias tenha propriedades hidrofóbicas, 
tornando-as evidentes apenas quando submetidas a 
técnicas de colorações especiais. Morfotintorialmente, 
as microbactérias apresentam-se na forma de bacilos, 
sutilmente curvos ou retos, álcool-ácido-resistentes. 
 
 
 
O método de gram se baseia no fato de que, quando 
certas bactérias são coradas pela violeta de genciana 
e depois tratadas pelo iodo, forma-se um composto 
de coloração escura entre o iodo e o corante, o qual 
é fortemente retido pelas bactérias e não pode ser 
facilmente removido pelo tratamento subsequente 
com álcool: são as bactérias gram positivas. Outras 
bactérias, chamadas de gram negativas, deixam se 
descoram facilmente pelo álcool. 
 
 
 
As bactérias são classificadas em Gram Negativa e 
Gram Positiva, a seguir iremos ver as características 
que as diferem.. 
 
 Parede celular das bactérias Gram Negativas. 
As bactérias Gram negativas possuem duas 
membranas celulares, uma membrana citoplasmática 
interna e outro externa. 
Entre essas duas membranas existe uma parede 
celular, essa parede celular é formada por 
peptidioglicano (mureína) que é uma junção de 
proteínas e açucares. Essa parede celular tem como 
função conferir resistência da bactéria á condições 
ambientais.. 
 
 
Então quando eu falo de bactérias gram negativas, 
estou falando de uma bactéria que tem a parede 
celular fina, que quando feita a coloração de gram, 
utilizando vários corantes, ao tratar com o álcool esses 
corantes são facilmente retirados, e por último 
quando o uso o corante rosa, a bactéria se cora de 
rosa. 
 
 
BACTERIAS GRAM POSITIVA E GRAM 
NEGATIVA 
 
COLORAÇÃO DE GRAM 
PRINCIPAIS TIPOS DE COLORAçõES: 
METODO DE ZIEHL-NEELSEN 
 
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 Lâmina de bactérias gram negativas. 
 
 Parede celular das bactérias Gram Positivas 
As bactérias gram positivas, possui uma única 
membrana, e tem a sua parede celular mais espessa, 
e quando eu submeto essa bactéria a corantes, o 
álcool não irá remover o corante roxo, pois a parede 
celular espessa não deixa esse corante sair, ai essa 
bactéria vai se corar de roxo. 
 
 
 Lâmina de bactérias Gram positivas. 
 
Resumo: O que vai determinar a cor da bactéria é a 
parede celular, parede fina-bactéria rosa, parede 
expessa-bactéria roxa.. 
 
Amostras e Tecidos 
 
As amostras de fluídos são coletadas e submetidas 
as seguinte análises: 
 Análise microbiológica 
 Análise sorológica 
 Análise da biologia molecular 
 
Tipos de amostras: Sangue, urina, fezes, escarro, 
líquor, pus em ferimento. Swabs: Ferimento, pele 
narina, garganta entre outro.s. Para saber qual 
amostra irei coletar é necessário saber qual o foco 
infeccioso. 
 
 Preparo do esfregaço 
 
Embora seja um método simples, é necessário o 
conhecimento de algumas regras básicas para que 
as amostram tenham uma boa qualidade. A limpeza 
das lâminas é fundamental para a confecção de um 
bom esfregaço. Elas devem estar livres de gordura, 
para isso são lavadas com água e sabão, enxaguadas 
e deixadas em recipiente com álcool e 
posteriormente seca-las com papel toalha para fazer 
o uso. 
 
Caso ela esteja suja, com gordura, os corantes que 
usaremos na coloração ira grudar na sujeira, o que 
iremos ver no microscópio vai ser sujeira, ao invés de 
bactérias. 
 
 Amostra 
Podemos usar vários tipos de amostras, no caso de 
uma infecção de garganta por exemplo, basta fazer 
um swab e levar no microscópico para fazer a 
análise microbiológica. 
 
 Fixação pelo calor 
É necessário aquecer a lâmina evitando com que os 
microorganismos sejam perdidos durante as 
colorações e sucessivas lavagens. 
 
 
 
É uma colocaração que utiliza um corante ácido 
(nanquim), repelido pelas cargas negativas da 
superfície das bacterias ou fungos. A lâmina de vidro 
sobre qual o material está, ficará corada enquanto o 
microorganismo aparecerá mais claro. Esse tipo de 
COLORACAO SIMPLES NEGATIVA 
 
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coloração é bastante utilizado para demonstração de 
cápsulas. Ex: Tinta Nanquim. 
PERGUNTAS TOPICO 2 
1) Explique as diferenças entre Gram negativo e 
Gram positivo? 
O que difere uma da outra é a expessura da 
parede celular, enquanto as bacterias gram 
negativas possuem a parede celular mais fina e 
mais mole, e com duas membranas envolta, as 
bacterias gram positivas não possuem essas 
membranas, ficando somente uma parece celular 
expessa e mais rígida. E são essas caracteristicas 
que quando coradas conferem uma cor rosa as 
gram negativas, e roxa as gram positivas. 
 
2) Explique como é feito a coloração de Gram: 
O método consiste em um esfragço bacteriano, fixado 
pelo calor com reagentes violeta de genciana, lugol, 
etanol-acetona fucsina. As bactérias que adquirirem 
coloração azul violeta, são chamadas de gram positivas 
e as que adquirem coloração rosa são chamadas de 
gram negativas. 
 
TÓPICO 3 
 
 
O que é crescimento bacteriano? É o aumento do 
número de células bacterianas. Os meios de cultura 
são insumos preparados em laboratórios que 
fornecem os nutrientes para o crescimento e 
desenvolvimento de microorganismos fora do seu 
habitat natural. Cada microorganismo possui 
necessidades diferentes, por isso o meio de cultura 
é adaptado para satisfazer essas necessidades, 
utilizando nutrientes específicos. Outros fatores 
devem ser levados em consideração para que tenha 
um meio de cultura adequado, como o PH, 
quantidade de oxigênio ou nada de oxigênio, 
temperatura e umidade. Os fatores de crescimento 
são. Os principais componentes de um meio de 
cultura são fontes de carbono, energia (açúcares), 
nitrogênio, fósforo e sais minerais. 
Estado Físico: 
Sólidos(2%): ágar sangue, ágar MacConkey; 
Semisólidos (0,4%): mortilidade bacteriana 
Líquidos: BHI (Brain Heart Infusion) 
 O Ágar Chocolate é amplamente utilizado para o 
cultivo de microrganismos exigentes, embora 
cresçam neste meio quase todos os tipos de 
microrganismos. ƒ À base do meio, é adicionado 
sangue de cavalo, carneiro ou coelho em 
temperatura alta, o que faz com que as hemácias 
lisem, liberando hemina e hematina, compostos 
fundamentais para o crescimento dos 
microrganismos exigentes. 
 
O ágar MacConkey é um meio seletivo, diferencial e 
de enumeração empregado no isolamento de 
bactérias gram negativas. Neste meio podem-se 
diferenciar bactérias fermentadoras da lactose, 
através da formação de colônias róseas, das bactérias 
não fermentadoras da lactose, com formação de 
colônias incolores. 
 
CRESCIMENTO BACTERIANO EM MEIO DE 
CULTURA 
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O Ágar sangue, usa uma base rica, oferece ótimas 
condições de crescimento a maioria dos 
microrganismos. A conservação dos eritrócitos 
íntegros favorecem a formação de halos de 
hemólise nítidos, úteis para a diferenciação de 
Streptococcus spp. e Staphylococcus spp. 
 
Os principais meios de cultura são: 
 Meio de cultura enriquecido 
O meio de cultura enriquecido apresenta uma 
grande porção de nutrientes que favorecem o 
crescimento de micro-organismos, até mesmo os 
que possuem maior dificuldade em crescer em 
cultura. 
 Meio de cultura seletivo 
O meio de cultura seletivo possui componentes que 
possibilitam o crescimento de determinados 
organismos e inibe a proliferação de outros. Exemplo: 
Ágar Mac Conkey- Bacilos G. 
 Meio de cultura diferencial 
Esses produtos possuem componentes que 
permitem diferenciar a cultura de organismos 
distintos em um mesmo meio. Para isso, utilizam 
corantes e outros produtos para promover essa 
diferenciação. Exemplo: Ágar sangue. 
 Meio de cultura de transporte 
Esses meios são úteis em situações que não é 
possível realizar a cultura logo no momento de 
coleta. Para isso, utiliza-se o meio de cultura de 
transporte, que permite a manutenção de boas 
condições para sobrevivência do organismo até que 
esse possa ser cultivado em seu meio de rotina. 
 Meio de cultura de triagem 
São meios de cultura que avaliam algumas 
características metabólicas dos organismos, 
permitindo identificá-los e caracterizá-los. 
 
 Meio de cultura de identificação 
Realizam provas bioquímicas para identificar 
determinadas características fisiológicas e peculiares 
de alguns micro-organismos. 
 Meio de cultura de contagem 
São muito úteis para verificar a quantidade de 
populações microbianas. 
 Meio de cultura de estocagem e 
manutenção 
Esses meios de cultura são os mais conhecidos e 
utilizados em laboratórios. Permitem que micro-
organismos e células sejam mantidos e estocados, 
garantindo nutrientes e um ambiente favorável ao 
seu crescimento. 
PERGUNTAS TOPICO 3 
1) Qual a função do ágar nos meios de cultura 
bacteriológicos? 
O ágar é um solidificante que é usado no 
preparo dos meios de cultura, que quando 
adicionado a um caldo nutriente (mistura de 
nutrientes específicos necessários para o 
cultivo de um determinado microrganismo), 
forma um meio de cultura. 
 
2) Explique como funciona o meio de cultura 
seletivo e de um exemplo. O meio de cultura 
seletivo como o próprio nome já diz, contém 
componentes em sua formula que 
possibilitam o crescimento de determinados 
organismos, inibindo a proliferação de outros, 
um exemplo é Ágar Mac Conkey. 
 
 
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TOPICO 4 
 
Os agentes antimicrobianos são produtos capazes de 
destruir microorganismos ou de suprimir sua 
multiplicação ou crescimento. Alexandre Fleming foi 
quem descobriu o primeiro antibiótico de utilidade 
clínica, a Penicilina. A tendência atual é de 
denominar-se antimicricobianos como dois tipos de 
produtos. 
Antibióticos: Antimicrobianos produzidos por 
microorganismos (bactérias, fungos, actinomicetes). 
Exemplo: Penicilinas. 
 
 
Quimioterápico: Antimicrobianos sintetizados em 
laboratório. Exemplos: Sulfas, quinolonas. 
 
Antibioticoterapia: 
É o tratamento de paciente com sinais e sintomas 
clínicos de infecção pela administração de 
antimicrobianos; Tem como finalidade curar-cura 
clínica e combater-cura microbiológica. 
 
Conceitos importantes: 
Toxicidade seletiva- Capacidade de lesar o 
microorganismo, sem ser tóxica para o hospedeiro 
 
Sinergismo- Quando a combinação de duas drogas 
aumenta atividade de ambas. 
 
Antagonismo- Quando um antimicrobiano diminui a 
ação de outro. 
 
Eles ainda podem classificados de acordo com sua 
origem: 
Naturais: Origem do metabolismo secundário de 
microorganismo. Exemplo: Penicilina 
 
Semi sintéticos: Antibióticos naturais, modificados 
quimicamente em laboratório. Exemplo: Amoxilina 
 
Sintéticos:: Sintetizados quimicamente. Exemplo: 
Sulfas 
 
Atividade 
Os antimicrobianos possuem ação biocida e ação 
biostática.. Um produto biostático inibe o 
desenvolvimento e a multiplicação das bactérias ,ou 
seja, cria um ambiente desfavorável para seu 
crescimento. Os biocidas tem finalidade especifica de 
matar micro-organismos ,atacando as bactérias de 
formas letais e irreversível 
 
Mecanismo de Ação: 
Inibição da síntese da Parede Celular: Estes agentes 
antimicrobianos correspondem aos mais seletivos, 
apresentando um elevado índice terapêutico. 
penicilinas, ampicilina e cefalosporinas: contém em 
sua estrutura um anel b-lactâmico, que interage com 
proteínas denominadas PBPs (Penicillin Binding 
Protein), inibindo a enzima envolvida na 
transpeptidação, responsável pela ligação entre as 
cadeias de tetrapeptídeos do peptideoglicano. Com 
isso, há o impedimento da formação das ligações 
entre os tetrapeptídeos de cadeias adjacentes de 
peptideoglicano, ocasionando uma perda na rigidez da 
parede celular. Acredita-se também que tais drogas 
podem atuar promovendo a ativação de enzimas 
autolíticas, resultando na degradação da parede. 
 
Agentes Antimicrobianos 
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Ligação a membrana citoplasmática 
São agentes antimicrobianos que muitas vezes 
exibem menor grau de toxicidade seletiva. Polimixinas: 
Ligam-se à membrana, entre os fosfolipídeos, 
alterando sua permeabilidade (detergentes). São 
extremamente eficientes contra Gram negativos, pois 
afetam tanto a membrana citoplasmática como a 
membrana externa. Ionóforos: Moléculas hidrofóbicas 
que se imiscuem na Membrana citoplasmática, 
permitindo a difusão passiva de compostos ionizados 
para dentro ou fora da célula.. 
 
Inibição da síntese de ácido nucleicos 
Seletividade variável. 
 Novobiocina: se liga a DNA girase, afetando o 
desenovelamento do DNA, impedindo sua replicação. 
Quinolonas: Inibem a DNA girase, afetando a 
replicação, transcrição e reparo. 
 Rifampicina: Ligação à RNA polimerase DNA-
dependente, bloqueando a transcrição. 
 
Inibição da tradução 
São geralmente bastante seletivos. Correspondem a 
um dos principais grupos de agentes antimicrobianos, 
uma vez que a síntese protéica corresponde a 
processo altamente complexo, envolvendo várias 
etapas e diversas moléculas e estruturas. 
 
 
 
TESTE DE SUSCEPTIBILIDADE AOS 
ANTIMICROBIANOS (TSA) OU ANTIBIOGRAMA 
Conceito: Teste para verificar o comportamento dos 
microrganismos (sensibilidade ou resistência) “in 
vitro”, frente a diversos antimicrobianos, para a 
escolha do antimicrobiano ideal. 
Indicações: Para microrganismos isolados e 
identificados como agentes causadores de infecção; 
Quando o microrganismo causador da infecção 
apresenta, estatisticamente, grande variabilidade no 
espectro de resistência ou tendência à mesma. Ex: 
Staphylococcus aureus, Pseudomonas sp. Cultura + 
Antibiograma 
PERGUNTAS TÓPICO 4 
1) Quais as diferenças do antimicrobianos 
sintéticos, naturais e semi sintéticos? 
Os antibióticos naturais são produzidos por outros 
microorganismo já existentes, 
Os antibióticos sintéticos são os que são 
produzidos em laboratóriosOs antibióticos semi sintéticos são antibióticos 
naturais, modificados quimicamente em 
laboratório. 
2) Qual mecanimos de ação geral dos 
antibióticos ? 
O antibiótico impede a reprodução do 
microrganismo, impossibilitando que a bactéria ou 
vírus continua a se multiplicar no corpo; 
O antibiótico também pode impedir a formação 
completa do peptidoglicano, uma substância que 
deixa a estrutura celular da bactéria muito mais 
rígida. 
 
TOPICO 5 
 Diagnostico Microbiologico 
 O diagnóstico laboratorial das doenças infecciosas 
começa com a indicação clínica adequada do exame 
microbiológico, o que requer conhecimento da 
epidemiologia e da fisiopatologia do processo 
infeccioso 
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Do ponto de vista clínico, o que significa dizer que 
uma bactéria é sensível, resistente, ou apresenta 
resistência intermediária? 
 • Resistente: significa que a bactéria não é inibida 
pelas concentrações de antimicrobiano alcançadas 
pelas doses habituais e há grande chance de falha 
terapêutica; a bactéria cresce na concentração sérica 
máxima do antimcrobiano no paciente 
; • Resistência intermediária: isolados cujas CIMs são 
próximas à concentração sérica máxima obtida por 
aquele antimicrobiano; 
 • Sensível: a categoria sensível implica que a infecção 
causada pela bactéria isolada pode ser 
adequadamente tratada com a dosagem 
recomendada para aquele tipo de infecção e para 
aquela espécie bacteriana, portanto o antimicrobiano 
pode ser utilizado para o tratamento; 
 
PERGUNTAS TOPICOS 5 
1) Qual a importância do diagnóstico 
Microbiologico? 
Através da microbiologia podemos identificar 
adequadamente as patologias causadas por 
diversos microorganismos. O antibiograma é 
utilizado para avaliar a sensibilidade dos 
agentes isolados frente aos antibióticos mais 
comuns. 
2) Quais são os principais métodos de 
diagnóstico de infecções bacterianas? 
O diagnóstico das infecções bacterianas pode 
ser feito pela demonstração direta da 
bactéria, de seus antígenos e de outras 
substâncias bacterianas nas secreções e nos 
fluidos do organismo, pelo isolamento e pela 
identificação da bactéria, pela dosagem de 
anticorpo séricos e pela pesquisa de 
hipersensibilidade tardia.