Aula Sintese Protéica

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Transcrição do
gene 1 produz um RNAm com uma sequencia de nucleotidio
complementar a uma das fitas de DNA.
Produz uma proteína com sequência aminoácida determinada pela sequência nucleotídica do RNAm.
(a) TRANSCRIÇÃO
(b) TRADUÇÃO
RNA
mensageiro
gene 1
gene 3
gene 2
DNA
(núcleo)
(citoplasma)
Em Procariotos, a transcrição e tradução ocorrem ao mesmo tempo, ou seja, um RNA mensageiro está sendo transcrito, o ribossomo se liga ao RNAm e a tradução começa.
	RNAt 
	Ribossomos
	Aminoácidos
	RNAm
	Fatores de Iniciação
	Fatores de Elongação
	Fatores de terminação
	Enzimas Aminoacil RNAt sintetase
	fonte de energia
 
RNA Transportador 
Estrutura do RNAt
RNAt
-Estrutura secundária com grampos e alças formando um trevo
-Alto número de bases modificadas depois da sua transcrição
Processamento do precursor do tRNA
Processamento
tRNA maduro
Modificação das bases
*
Bases modificadas nos RNAt
*
As bases oscilantes do RNAt
	Um RNAt pode reconhecer freqüentemente vários códons por causa da ocorrência de pontes de H não padrão entre os nucleotídeos.
	Este efeito é chamado Hipótese da Base Oscilante
CÓDIGO GENÉTICO 
PROPRIEDADES:
	Universalidade 
	Redundância
	Degeneração 
Ribossomos
Ribossomos são compostos de RNA e proteínas
Processamento do precursor do rRNA
Metilação das bases
Clivagem
RNAs maduros
RNA precursor 30S
*
RNA Ribossômico (RNAr)
	2/3 RNA & 1/3 proteina
	2 sub unidades
	Coordena a síntese protéica
Sítios do RNAr
Tradução
	Fases
Pré-Iniciação
Iniciação
Alongamento
Terminação 
Sítio de Síntese 
 
A síntese vai do N-terminal até o C-terminal da proteína. 
	Os ribossomos lêem o RNAm na direção 5' para 3'.
 
	A tradução ativa ocorre nos polissomos. Ou seja, mais de um ribossomo pode se ligar e traduzir certo RNAm a qualquer tempo. 
	O alongamento da cadeia ocorre por adição seqüencial de aminoácidos ao ponta C-terminal do ribossomo.
Seqüência de eventos da Síntese Protéica:
Pré-iniciação
Ativação dos aminoácidos
	Enzima responsável: RNAt sintetase 
	Uma para cada aminoácido;
	AA liga-se ao 3´do seu RNAt 
Estrutura dos Aminoacidos
*
The side chains are responsible for the various properties of the amino acids. They can be:
Polar, hydrophillic
Non-polar and hydrophobic
Some are considered special cases: glycine (smallest), cyclic ring structure (proline), and sulfur containing (cysteine)
Iniciação 
	Aminoacil RNAt se liga no sítio P do ribossomo;
	Códon de iniciação (Pro e Euc) AUG tRNAMeti (Euc)
	Bactérias: grupo formil ligado a Metionina RNAtfMet
	Grupo formil retirado depois 
	Seqüências de Shine Delgarno- precede o códon AUG; onde RNAr 16S da subunidade menor se liga.
Iniciação da tradução
	N-formilmetionina é o primeiro aminoácido incorporado nas bactéria (eucariotos usam metionina).
	Existe um RNAt iniciador especial que se liga ao primeiro aminoácido no complexo ribossômico (tRNAfMet em bactéria, tRNAiMet em eucariotos)
*
In eukaryotic systems, the process is significantly different. Recognition of the translation start site by the small ribosomal subunit requires different types of factors than in prokaryotes. Most eukaryotic mRNAs have a single start site near the 5’ capped end of the mRNA. The small ribosomal subunit interacts with the methylated 5’ cap and eIF proteins. To assemble a eukaryotic pre-initiation complex, an active ternary complex of eIF2-GTP and Met-tRNA associates with a small 40S ribosomal subunit complexed with 2 other factors, eIF3 and eIF1A. Cells can regulate protein synthesis by phosphorylating a serine residue on the eIF2B.
Iniciação (cont.) 
	Fatores de Iniciação em bactérias : IF1, IF2 e IF3.
	IF1 e 2: só atua com RNAt iniciador no sítio P;
	IF3: 30S dissociada de 50S;
	Complexo de Iniciação:30S+RNAm+RNAt i
	Fatores de iniciação se dissociam antes da fase de alongamento 
Fatores de Iniciação
	RNAt iniciador
	Fatores protéicos de iniciação para formar o complexo ribossomo-RNAt-RNAm
	3 Fatores de iniciação em Procariotos: IF1, IF2 e IF3
	Ao menos 8 fatores de iniciação em Eucariotos
Alongamento
	AA são adicionados a cadeia em crescimento;
	Fatores de alongamento: EF-Tu
 EF-G
Sitio A do ribossomo ocupado pelo aa2
Ligação peptidica: Peptidil transferase 
Alongamento
	No final da formação do complexo de iniciação, a formilmetionina tRNAfMet ocupa o sitio P do ribossomo
	EF-Tu se liga no próximo tRNA no sitio A do ribossomo
Figure 22.15 &22.21
Terminação da Tradução
	Quando o ribossomo alcança o códon de parada no sitio A, um dos 3 fatores de liberação inicia a hidrólise da cadeia polipeptídica e libera o RNAt no sitio P 
	RF-1	reconhece UAA e UAG
	RF-2	 reconhece UAA e UGA
	RF-3 se liga a GTP e aumenta os efeitos de RF-1 e RF-2
Término
	Entrada de um códon de parada (UAA, UAG ou UGA) no sitio A;
	Fator de liberação entra no sitio A e dispara a hidrólise do peptídeo, liberando a proteína
Eventos Pós-Traducionais
	Geralmente, proteínas estão inativas após transcrição;
	Dobramento por chaperonas 
	Modificação de cadeias laterais de aminoácidos;
	Eucariotos tem seqüências curtas (15 a 20 aa) para direcionar destino das proteínas;
Seqüências de Sinal
SLN (seqüência de localização nuclear) 
MODIFICAÇÃO DAS PROTEINAS 1
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MODIFICAÇÃO DAS PROTEINAS 2
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MODIFICAÇÃO POS TRADUÇÃO DAS PROTEINAS
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Ex: PROCESSAMENTO DA INSULINA
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