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COOMBS INDIRETO O teste de permite a identificação de anticorpos anti eritrocitários no soro do paciente, e tem a importância na avaliação de gestantes com sorotipo Rh (-), nas fases pré e pós transfusionais, epecialmente em pacientes nos pacientes que já passaram pelas transfusões, onde pode ter ocorrido sensibilização para Rh e outros sistemas.O teste identifica diferentes anticorpos, de acordo com a fase do teste que apresentou positividade. A ocorrência de aglutinação durante qualquer etapa do teste indica a possibilidade da presença de anticorpos irregulares. Material: SORO Transportar refrigerado: (2°C a 8°C) Coombs Indireto Negativo Se o exame der negativo, significa que a gestante não tem anticorpos contra o Rh positivo. Nesse caso, a mulher deverá fazer um tratamento ainda na gravidez, entre as 28ª e 33ª semana de gravidez, tomando uma injeção de imunoglobulina anti-D, como forma de prevenção contra o Rh positivo. Coombs Indireto Positivo Se o exame de Coombs indireto der positivo, significa que a gestante tem anticorpos contra o sangue Rh positivo e, por isso, não adianta tomar a injeção como tratamento. Nesse caso, há riscos para o bebê. Isso porque ele pode ser “atacado” pelos anticorpos de Rh positivo e, por consequência, sofrer de anemia. Em situações graves, recomenda-se transfusão de sangue intrauterina. Acima de 30 semanas, alguns médicos consideram também a antecipação do parto, pois a partir daí o bebê tem grandes chances de sobreviver fora do útero materno. Através do teste de Coombs Indireto, pesquisa-se a presença de anticorpos incompletos ou imunes presentes no soro. Técnica: a) Preparar uma suspensão salina a 5% com hemácias conhecidas quanto ao antígeno e cujo anticorpo correspondente se deseja detectar (o mais comum é a detecção de anticorpos anti- Rh positivo, anti-D). As hemácias devem ser compatíveis com o soro quanto ao sistema ABO. b) Colocar duas gotas da suspensão em um tubo de 12 x 75 mm e lavar três vezes com solução salina; c) Adicionar duas gotas do soro a ser testado; d) Misturar e incubar em banho a 37oC, durante 30 a 45 minutos; e) A seguir, lavar as hemácias três vezes com solução salina e adicionar o soro anti-globulina humana (duas gotas); f) Agitar e centrifugar a 1.000 r.p.m. por 15 segundos; g) proceder a leitura. Interpretação: · Presença de aglutinação: Teste de Coombs Indireto Positivo · Ausência de aglutinação: Teste de Coombs Indireto Negativo Observações: 1. É aconselhável o emprego de controles positivos e negativos. 2. Nos casos da prova de Coombs Indireta ser positiva, o soro deverá ser diluído em salina (1/2, 1/4, 1/8, 1/16, etc) e repetir a prova em cada um dos tubos. O título será dado pela última diluição com resultado positivo. 3. A pesquisa de anticorpos poderá ser feita em meio salino (sem emprego do soro de Coombs); em meio albuminoso (albumina) ou ainda utilizando-se hemácias previamente tratadas por enzimas (tripsina, etc).