Roteiro estudo replicação

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UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO NORTE
CENTRO DE BIOCIÊNCIAS
DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA CELULAR E GENÉTICA
Disciplina: Genética		
Professoras: Lucymara F. Agnez Lima
ROTEIRO PARA ESTUDO 
Aula 3: Replicação	
Conceitos: replicação, origem de replicação, primer, primase, DNA polimerase, síntese translesão, bolha de replicação, forquilha de replicação, fita leading, fita lagging, fragmentos de Okazaki, DNA ligase, helicase, telomerase, PCNA, RPA, RFC, SSB, -clamp, replissomo.
1. Discorra sobre a importância da replicação do DNA para perpetuação das células e das espécies; 
2. Em que situações celulares a replicação se faz necessária?
3. Explique o experimento de Meselson-Stahl que demonstrou que a replicação é semiconservativa.
4. Explique e compare o processo de replicação em procariotos e eucariotos. Descreva as funções desempenhadas pelas diferentes proteínas envolvidas na replicação.
5. Caracterize as funções das diferentes DNA polimerases.
6. Qual a importância da fidelidade da replicação? Explique como esta fidelidade é assegurada.
7. Explique o papel da telomerase no término da replicação.
8. Imagine que uma bactéria é resistente a determinado antibiótico devido à existência de um plasmídeo. O que seria esperado, com relação ao fenótipo de resistência, se o plasmídeo perdesse sua origem de replicação?
9. Você deseja reproduzir a replicação in vitro. Como você procederia para isto? Que fatores seriam essenciais? Que fatores seriam substituíveis ou dispensáveis?
10. Bactérias E. coli foram crescidas em meio com 15N durante várias gerações. Em seguida, essa cultura foi transferida para um meio com apenas 14N, onde sofreram três replicações sucessivas. Que previsão se pode fazer a respeito das porcentagens dos diferentes tipos de moléculas após essas replicações?
11. Explique porque certas variedades mutantes da DNA polimerase I podem apresentar atividade de DNA polimerase praticamente ausente, mas podem ter atividade de exonuclease 5'  3' praticamente normal. 
12. Qual a atividade da DNA polimerase III que é responsável pela editoração durante a replicação? 
13. Que propriedades do DNA e da DNA polimerase sugerem que a duas fitas não podem ser replicadas pelo crescimento no mesmo sentido? Como a célula supera o problema? Esquematize a formação da ligação fosfodiester durante a replicação a partir do nucleotídeo trifosfato livre mostrando o grupo fosfato que é incorporado. 
14. Considere que você foi convidado a dar uma aula sobre replicação, como você explicaria a figura abaixo?
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