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ANTIBIOGRAMA Teste de Sensibilidade aos Antimicrobianos (TSA) Profa.Dra. Maria José de Britto Costa Fernandes – UFRN/2018 ALEXANDER FLEMING 1928 Profa.Dra. Maria José de Britto Costa Fernandes – UFRN/2018 BACTÉRIAS: ❖Streptomyces - estreptomicina, canamicina, neomicina, tobramicina, eritromicina, rifampicina, tienamicina, vancomicina ❖Bacillus - polimixinas, bacitracina ❖Chromobacterium - aztreonam ORIGEM DOS PRINCIPAIS ANTIBIÓTICOS FUNGOS: Penicillium - penicilinas Cephalosporium - cefalosporinas • Inicialmente se utiliza-se um antibiótico de largo espectro até que a sensibilidade do microrganismo seja determinada. FINALIDADE DO TSA VERIFICAÇÃO DA SENSIBILIDADE E RESISTÊNCIA BACTERIANA MÉTODOS DE AVALIAÇÃO DIFUSÃO DOS DISCOS (KIRBY-BAUER) DILUIÇÃO EM CALDO OU AGAR MÉTODOS DE AVALIAÇÃO DILUIÇÃO EM CALDO OU AGAR KIRBY e BAUER 1966 ( Teste de difusão em disco) DIFUSÃO DOS DISCOS DIFUSÃO EM AGAR TÉCNICA QUALITATIVA - o método avalia o halo de inibição. FUNDAMENTO- Difusão da droga em uma matriz sólida (agar) com diluição do antibiótico no disco, produzindo áreas de concentração decrescente. PADRONIZAÇÃO DE KIRBY e BAUER (DIFUSÃO) PREPARO DO INÓCULO (0,5 de McFarland - 3 x 108 UFC/mL) MEIO DE ESCOLHA (Agar Muller Hinton e espessura do meio) SEMEADURA (Distensão) USO DE DISCOS (Validade) INCUBAÇÃO E LEITURA (37ºC – 24hs e medição dos halos) Teste de Sensibilidade aos antimicrobianos (TSA) Disco difusão – Procedimento Inóculo - cultura pura Colônias Inoculação em salina 0,9% - 4 a 5 colônias Teste de sensibilidade aos antimicrobianos (TSA) Disco difusão – Procedimento Teste de sensibilidade aos antimicrobianos (TSA) Disco difusão – Procedimento Inóculo - 0,5 de McFarland - 3 x 108 UFC/mL Inoculação do meio Muller Hinton com swab eTeste de sensibilidade aos antimicrobianos (TSA) Aplicação dos Disco – Procedimento ❖Colocar no máximo 12 discos em placas de 150 mm e cinco discos em placas de 90 mm. ❖Uma vez colocado o disco, não remoer do lugar, pois a difusão da droga é imediata. Leitura - medida do halo de inibição Teste de Sensibilidade aos antimicrobianos RESISTENTE Os halos de inibição pra cada microrganismo testado devem ser interpretados nas categorias sensível, intermediário ou resistente, de acordo com os critérios estabelecidos nas tabelas do CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) revisadas anualmente. INTERPRETAÇÃO DO ANTIBIOGRAMA SENSÍVEL – Doses terapêuticas usuais POUCO SENSÍVEL ou INTERMEDIÁRIO – Dose máxima parenteral RESISTENTES – Não são inibidos DIFUSÃO DOS DISCOS VANTAGENS: FÁCIL EXECUÇÃO GRANDE UTILIZAÇÃO CUSTO OPERACIONAL MENOR