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24/10/2017 1 Yersinia e Shigella Micro-organismos Indicadores Nathália Cirone •• Bacilos Bacilos GramGram negativosnegativos •• Não formadores de Não formadores de esporosesporos. ShigellaShigella • Estados Unidos: S. sonnei • Brasil predomina a espécie S. dysenteriae. DISENTERIA BACILAR CLÁSSICA Shigella • Lactose-negativas • Tº Crescimento: 10 a 48ºC – Ótima de 37ºC • pH 5-8 Shigelose • Dose infectante: 10 a 200 células • Período de incubação: 8 a 50 horas • Sintomas: dores abdominais, febre, vômitos, diarreia, fezes com pus, sangue e muco • Complicações: ulceração da mucosa e sangramento retal, desidratação, síndrome urêmica hemolítica (HUS), síndrome de reiters • Duração da doença: 5 a 7 dias • Mortalidade: 10-15% Patogenicidade • Produção de ShigaToxina (citotóxica) • Invasão celular • Movimento intracelular na célula 24/10/2017 2 Patogenia • Invasão no íleo e cólon e destruição da camada da mucosa • Reação inflamatória:muco e sangue nas fezes • Atinge espaço subepitelial, são fagocitadas por macrófagos • Após infecção do enterócitos, ocorre multiplicação e invasão de novas células Yersinia sp. • Bastonetes Gram negativos • Não esporulados • Infecção por Y. enterocolitica associada ao consumo de produtos de carne de porco cru ou mal cozidos. • Infecção por Y. pseudotuberculosis associado ao consumo de produtos frescos crus. Yersinia enterocolitica Yersinia enterocolitica • Crescimento ótimo a 22-29ºC • Crescimento: -2ºC a 45ºC • Anaeróbia facultativa – Risco em embalagens com ATM ou vácuo • valor D62,8= 0,7 a 17,8 segundos, inativado a 60°C por 1 a 3 min. • Não sobrevive a pasteurização • pH de crescimento: 4,6 a 9,0; • 7% de NaCl é inibitória •• SintomasSintomas • Dor abdominal • Diarréia aguda e febre (crianças) • Linfadenite mesentérica aguda (parece apendicite) • Infecção sistêmica • Diarreia sanguinolenta (10-30%: crianças) INOCUIDADEHIGIENE MICRO-ORGANISMO INDICADOR INDICADOR HIGIÊNICO-SANITÁRIO 24/10/2017 3 ♦ Possível presença de patógenos ♦ Deterioração potencial do produto ♦ Contaminação fecal e ambiental MICRO-ORGANISMO INDICADOR ♦ O indicador deve, preferencialmente, ser de uma única espécie ou abrigar poucas espécies com características em comum, afim de identificá-los dos outros microrganismos presentes no alimento. Características desejáveis em um indicador ♦ O indicador deve ter origem entérica e compartilhar mesmo ambiente que o patógeno, estando sempre estar presente na presença do patógeno ♦ Elevada concentração nas fezes. ♦ Técnicas de detecção rápidas, simples e precisas. Características desejáveis em um indicador ♦ O indicador não deve ser patogênico, para que sua manipulação em laboratório não necessite de precauções de segurança, exigidas aos patógenos. ♦ O indicador deve ser detectado mesmo na presença de altas concentrações de outros micro-organismos. ♦ Habitar, exclusivamente, o trato intestinal do homem e animais de sangue quente. Características desejáveis em um indicador ♦ O indicador deve crescer e ter uma taxa de sobrevivência, no alimento, semelhante ao patógeno. ♦ O indicador não deve sofrer injúria subletal em maior grau que o patógeno, quando exposto a stress físico ou químico. ♦ Deve haver uma relação direta entre o nível de um indicador e a probabilidade da presença de um patógeno entérico no alimento. 1. COLIFORMES TOTAIS (CTo) ♦ Definição: - bastonetes Gram negativos - não formadores de esporos - crescer em sais biliares - anaeróbios facultativos - fermentar a lactose com produção de gás a 35ºC/48h INDICADOR HIGIÊNICO 24/10/2017 4 2. COLIFORMES TERMOTOLERANTES (CTe) ♦ Definição: - bastonetes Gram negativos - não formadores de esporos - crescer em sais biliares - anaeróbios facultativos - fermentar a lactose com produção de gás a 45ºC/24h + Diluição 10-1 25 g ou mL de alimento 225 mL de água tamponada Número Mais Provável de CTo e CTe Número Mais Provável de Coliformes Etapa Presuntiva 10-1 mL 10-2 mL 10-3 mL caldo lauril sulfato 35ºC/48 horas 10-1 mL 10-2 mL 10-3 mL Etapa Confirmatória Número Mais Provável de Coliformes Etapa Presuntiva MÉTODOS RÁPIDOS E/OU MINIATURIZADOS Métodos Enzimáticos (meios líquidos) ♦ Colilert (Idexx) ♦ Readycult coliforms (Merck) ♦ Coliquick (Hach) ♦ Colisure (Millipore) Contagem Padrão 55ºC/24h termófilo 7ºC/10 d psicrotrófico 35ºC/48h mesófilo 24/10/2017 5 3.1. Mesófilos ♦ são indicadores higiênicos, mas podem ser considerados sanitários, se estiverem em concentrações elevadas. ♦ Matéria prima contaminada; ♦ Condições higiênicas de produção inadequadas; ♦ Condições inadequadas de tempo e temperatura, durante manutenção; 3.2. Psicrotróficos - grupo importante em alimentos refrigerados. - capacidade de crescer em temperatura de refrigeração. - associados com deterioração de produtos refrigerados. - ex. Pseudomonas, Erwinia, Clostridium, Micrococcus. 3.3. Termófilos - avaliam o grau de deterioração de produtos enlatados, que sofreram tratamento térmico. ♦ indicadores de qualidade higiênica em alimentos de baixa Aa e de baixo pH. ♦ provável presença de micotoxinas. 4. BOLORES E LEVEDURAS ♦ útil para produtos como produtos lácteos fermentados, frutas, sucos e polpas processadas