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24/10/2017 1 Enterobactérias Enterobacteriaceae • 30 gêneros • + 120 espécies • Bacilos Gram • -negativos • Anaeróbios facultativos • Fermentam a glicose • Deteriorantes • Patogênicos - Família: Enterobacteriaceae - Gênero: Salmonella (2.610) - S. bongori (V) (23) - S. enterica (2.587) - S. salamae (II) (513) - S. arizonae (IIIa) (100) - S. diarizonae (IIIb)(341) - S. houtenae (IV) (73) - S. indica (VI) (13) - S .enterica (I) (1547) S. Paratyphi A S. Choleraesius S. Paratyphi B S. Oranienburg S. Thyphimurium S. Infantis S. Agona S. Newport S. Derby S. Typhi S. Saintpoul S. Anatum S. Enteritidis 24/10/2017 2 ESPÉCIE SUBESPÉCIE SOROVAR Salmonella enterica enterica Enteritidis Nomenclatura - bastonetes Gram negativos, oxidase negativa, glicose positiva. - lactose negativa, H2S positivo. - maioria das espécies é móvel por flagelo peritríquio. Características Gerais ♦ Temperatura - 35-37ºC - 5ºC e 47ºC ♦ pH - 7 – 7,5 - 3,8 a 9,5 ♦ Aw - 0,97 (0,94 0,99) - não cresce < 0,93, mas sobrevive Características de Desenvolvimento ♦ intestino do homem e outros animais de sangue quente ou frio PORTADORES OU DOENTES Veículos de Transmissão ♦ água doce ou de estuário contaminadas - carnes e derivados - leite e derivados - ovos - frutos do mar - saladas - chocolate ♦ alimentos - agente: S. Typhi. ♦ febre sistêmica causada pela ingestão de água ou alimentos contaminados. ♦ período de incubação: 1 semana a 1 mês. ♦ sintomas: anorexia, dores de cabeça e abdominais, febre. Podem ocorrer convulsões, delírios e calafrios, hepatomegalia e esplenomegalia. ♦ taxa de mortalidade: 10%. Febre Tifóide ♦ agentes: S. Enteritidis, S. Typhimurium ♦ período de incubação: 6 a 24 horas ♦ sintomas: dores abdominais, diarréia, vômito e febre. As vezes pode ocorrer sangue nas fezes. - septicemia - síndrome urêmica hemolítica - meningite - osteomielite - pneumonia - endocardite Infecções Gastrentestinais Infecções Extra- intestinais 24/10/2017 3 ♦ controle da disseminação entre animais ♦ eliminação de portadores ou limitar presença em ambiente de manipulação ♦ evitar consumo de ovos crus ♦ armazenar alimentos T <5ºC ou > 65ºC ♦ evitar contaminação cruzada ♦ higiene pessoal ♦ sanificação de equipamentos e utensílios Medidas de Controle 1º dia ISOLAMENTO E IDENTIFICAÇÃO 25 g + 225 mL de água tamponada peptonada 0,1 mL Caldo Rappaport- Vassiliadis 1 mL Caldo Tetrationato 24h 2º dia XLD SS CROmagar HE 3º dia 35°C/24h42°C/24h - fermentam glicose com produção de gás - oxidase negativa - maioria móveis - anaeróbios facultativos E. Coli - Características gerais - bastonete Gram negativos ♦ temperatura - multiplicação: 8 a 45,5ºC - ótima: 30 a 42ºC Influência de fatores químicos e físicos - sobrevivem em temp. de refrigeração: 3-7ºC ♦ Atividade de água - multiplicação: até 0,95 - ótima: 0,995 ♦ pH - multiplicação: 4,4 a 9,0 - ótima: 6,0 a 7,0C - se todos os outros parâmetros estiverem ótimos: Influência de fatores químicos e físicos - pH 2,0 por 4 horas - pH 3,5 por vários meses Patogenicidade de E. coli - ETEC: E. coli enterotoxigênica - EPEC: E. coli enteropatogênica - EIEC: E. coli enteroinvasiva - EHEC: E. coli enterohemorrágica - EAEC: E. coli enteroagregativa - DAEC: E. coli com aderência difusa 24/10/2017 4 - sintomas - diarréia aquosa - febre baixa - dores abdominais - náuseas - forma mais severa: semelhante ao cólera - período de incubação: 8 a 48 horas - DMI alta: entre 106 a 108 UFC E. coli enterotoxigênica FATORES DE VIRULÊNCIA DE ETEC 1. Fatores antigênicos de colonização (CFA) - CFA I - CFA II - E8875 - CFA III - pili longus - pili tipo1 FATORES DE VIRULÊNCIA DE ETEC 2. Enterotoxinas - LT I: associadas a doenças no homem - LT II: isolada de animais, raro no homem e sem associações a doenças - tipos 2.1. Toxina termolábil (LT) 2.1. Toxina termoestável (ST) - STa: metanol solúvel (se liga ao guanilato ciclase) - STb: metanol insolúvel (doença em humanos?) - tipos 1. Fímbria BFP (bundle forming pillus) - adesão ao epitélio - ligação entre as bactérias formando um padrão de adesão localizada. Fatores de Virulência E. coli enteropatogênica Fatores de virulência 1. Toxina de Shiga (STx) - STx 1: imunologicamente idêntica à toxina de Shigella dysenteriae. - STx 2: imunologicamente relacionada com a mesma toxina. - ação:morte celular por interrupção da síntese proteica. EHEC 24/10/2017 5 - padrão de adesão (adesão agregativa) exclusiva em determinadas linhagens celulares. 1. Fatores de virulência - EAST: aumenta GMPc - PET (plasmid encoded toxin): alterações da rede de actina: efeito citopático e enterotóxico. EAEC 2. Patogênese Bactéria adere na mucosa intestinal Hiperestimulação da camada de muco Produção de toxinas e processo inflamatório Diarréia persistente (14 dias) 2. Patogênese Bactéria adere na mucosa intestinal Hiperestimulação da camada de muco Produção de toxinas e processo inflamatório Diarréia persistente (14 dias) íleo terminal e cólon invasão e destruição do epitélio intestinal com intensa reação inflamatória diarréia aquosa à disenteria bacilar clássica Patogênese EIEC E. Coli O157:H7 • E. coli produtora de toxina de shiga (STEC) • Fatores de virulência: – Hemolisina – Intimina – Toxina de shiga • Sintomas: – Diarréia – Colite hemorrágica – Sindrome uremica hemolítica • Reservatório Diferença entre O157:H7 e não- O157:H7 • Relacionado ao conteúdo genético – O157:H7 • Stx1/stx2, pO157 • Muitos estudos – não- O157:H7 • Stx1 ou stx2 • Poucos estudos Escherichia coli O104:H4 • Colite hemorrágica/Sindrome hemolítica urêmica • Mais de 1000 pessoas • 16 países • mais de 30 pessoas morreram • Pepino espanhol foi o primeiro suspeito • Broto de feijão • Análise epidemiológica: Sementes de couve importadas do Egito em 2009 foram a fonte 24/10/2017 6 O que aprendemos? • Patógeno sobrevive por mais de 2 anos em sementes secas • Rastrear a fonte não teve sucesso no início • Alto custo para países como Espanha, Egito, Alemanha e outros na Europa • Morte de adultos • Mutação a partir de EHEC e EAEC • Novo patógeno 1. Semeadura em meios seletivos e diferenciais Isolamento e Identificação de E. coli Ágar MacConkey Ágar Eosina azul de metileno 2. Identificação das cepas isoladas - testes bioquímicos convencionais: IMViC -Indol, vermelho de metila, voges proskauer e citrato Enterobacter sakazaki (Cronobacter) • Patógeno oportunista: relacionado a meningites e enterocolites em recém nascidos. • Raro, porém com alta taxa de mortalidade de 20 a 50%. • Causa ulcerações e necrose intestinal ( enterocolite necrosante). • Associado a formulações lácteas infantis.