Biomedicina

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51Biomedicina na prática: 
da teoria à bancada SUMÁRIO
Procedimento:
1. Comprimento de onda em espectrofotômetro: 505 nm
2. Temperatura: 37˚C
3. Para cada série de análises deve ser processado um padrão de trabalho.
B (branco) P (padrão) T (teste)
Reagente glicose 1,0 mL 1,0 mL 1,0 mL
Padrão de glicose - 0,01 mL -
Amostra - - 0,01 mL
Dica: Misturar bem e incubar durante 5 minutos a 37ºC. Ajustar o equipamento em zero utilizando 
o tubo B. Determinar a absorbância da solução padrão e da amostra, e proceder aos cálculos. A reação 
mantém-se estável por 60 min.
Cálculos
Glicose (mg/dL) = Absorbância do teste x 100 
        Absorbância do padrão
Onde: 100 é a concentração do padrão em mg/dL
Podendo-se calcular o fator de calibração através da seguinte fórmula:
Fator = 100/Absorbância do Padrão
Usando-se o fator de calibração: Glicose (mg/dL) = Fator x absorbância do teste.
Observe: Caso o valor do padrão de Glicose não seja 100 mg/dL, atribuir o valor de bula 
ou rótulo do mesmo.
AMOSTRAS TESTE: Observar os achados de glicose nos seguintes materiais:
Urina;
Adoçante;
Refrigerante Normal;
Refrigerante Light;
Responder:
Avalie as cores dos frascos contendo padrão e amostra. Qual está mais forte? O que 
significa?
9. PRÁTICA: Extração de lecitina e identificação de seus produtos de hidrólise
A lecitina (fosfatidil-colina) é um tipo de fosfoglicerídeo que contém duas moléculas de 
fosfoglicerídeo que contém duas moléculas de ácido graxo, um saturado e um insaturado, 
que esterificam as hidroxilas dos C1 e C2 do glicerol, respectivamente. A hidroxila do C3 é 
esterificada com ácido fosfórico que está unido a um álcool aminado (colina).
52Biomedicina na prática: 
da teoria à bancada SUMÁRIO
A fosfatidil-colina faz parte da composição molecular das membranas biológicas e 
está também presente nas lipoproteínas do plasma sanguíneo e tem ação detergente. Nos 
mamíferos, apenas 20% da necessidade de fosfatidil-colina é suprida pela “Biossíntese de 
novo”. A biossíntese ocorre no fígado, a partir de fosfatidiletanolamina + 3 moléculas de 
S-adenosilmetionina, doadoras de radical metila (-CH3). Os demais 80%, são obtidos pela “via 
de salvação”, na qual a colina proveniente da dieta é fosforilada por ação da colina quinase, 
formando fosfocolina, que é precursora da fosfatidil-colina.
Uma dieta deficiente de colina, e com baixo teor de proteína, faz com que haja formação 
do chamado “fígado gordo”. Uma das formas de exportar ácidos graxos para fora do fígado 
se dá sob a forma de constituintes de lipoproteínas. Quando há diminuição na síntese de 
fosfatidil-colina, a velocidade com que os ácidos graxos são transportados para fora do fígado 
sob esta forma diminui, com consequente acúmulo de triglicerídeos.
Uma das grandes fontes de lecitina da dieta é a gema de ovo. À venda, existem cápsulas 
de lecitina de soja e medicamentos contendo colina e metionina (auxiliam na prevenção do 
fígado gordo).
9.1. Extração da Lecitina da gema do ovo
A lecitina é isolada da gema de ovo através de tratamentos sucessivos com acetona e 
clorofórmio. A acetona desidrata as proteínas, desnaturando-as, extrai pigmentos e a maioria 
dos lipídios da gema, com exceção dos fosfolipídeos (lecitina). O tratamento do resíduo 
cetônico obtido, com clorofórmio, permite a extração dos fosfolipídeos, ou seja, da lecitina.
Procedimento:
1. Colocar a terça parte de uma gema de ovo em um copo de Becker de 100 mL;
2. Adicionar 15 mL de acetona, misturar bem com bastão de vidro e deixar em repouso 
por alguns minutos;
3. Decantar o sobrenadante para um balão Erlenmeyer com o auxílio de um bastão de 
vidro, procurando reter o resíduo no copo;
4. Tornar a adicionar 10 mL de acetona ao resíduo. Misturar bem e decantar, repetindo 
esta operação mais 4 ou 5 vezes, até que o precipitado se torne esbranquiçado. 
Adicionar finalmente, 5 mL de acetona e filtrar através de um papel filtro. Os sucessivos 
sobrenadantes de acetona devem ser desprezados.
5. Abrir o papel filtro, contendo o resíduo cetônico, sobre uma placa impermeável 
(azulejo);