Biomedicina

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145Biomedicina na prática: 
da teoria à bancada SUMÁRIO
de colônias. Materiais indicados ou recomendados para este tipo de semeadura: Urina, BAL 
(lavado bronco alveolar), aspirado traqueal, Biópsia de tecido, líquido de diálise, Secreção 
prostática, Cateter (técnica de Maki e outras).
Materiais:
- Álcool 70%; 
- Luvas;
- Bico de Bunsen;
- Alça de inoculação;
- Jaleco;
- Sabonete líquido; 
- Máscaras;
- Autoclave;
- Placas de Petri com o meio de cultura selecionado;
- Estufa bacteriológica.
Procedimentos:
1. Descarregar o material num canto da placa.
2. Flambar a alça.
3. Esfriar a alça em um canto do ágar.
4. Semear partindo da ponta da primeira semeadura.
5. A cada mudança de direção flambar a alça e esfriá-la.
6. Observe a figura abaixo:
Fonte: Levy, 2004. 
2.3. Técnica de Semeadura Quantitativa:
O cultivo quantitativo baseia-se na semeadura de um volume conhecido de material e 
a contagem do número de UFC (unidades formadoras de colônia) obtidas após incubação. 
Utilizam-se dois artifícios para o efeito de diluição do material:
• Uso de pequenos volumes: normalmente de 1, 10 ou 100 μL. O número de UFC 
obtido deverá ser multiplicado pelo fator de correção para 1 mL, relativo ao volume 
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inoculado; 1.000, 100 ou 10, respectivamente. Pode ser realizada utilizando-se volume 
de material definido por alça calibrada ou pipeta com ponteira estéril.
• Técnicas dilucionais: costuma-se utilizar a diluição seriada do material em escala 
decimal, isto é, 1:10, 1:100, 1:1.000 etc. O número de UFC obtido deverá ser multiplicado 
pelo fator de correção para 1 mL, relativo à diluição utilizada.
Materiais:
- Álcool 70%; 
- Luvas;
- Bico de Bunsen;
- Alça de inoculação calibrada;
- Pipetadores automáticos de todos os volumes;
- Ponteiras;
- Jaleco;
- Sabonete líquido; 
- Máscaras;
- Autoclave;
- Placas de Petri com o meio de cultura selecionado;
- Estufa bacteriológica;
- Agitador de tubos tipo vórtex.
Procedimento:
1. Homogeneizar o material com agitação manual em diferentes direções ou em vórtex 
(mixer).
2. Obter o volume definido pela técnica com o auxílio de uma pipeta com ponteira 
estéril ou alça calibrada. No caso da alça, observar a integridade da película formada 
até depositá-la na parte superior da placa. Ainda com a alça, sem flambar até 
o final da semeadura, distribuir o material em linha reta até a outra extremidade. 
Perpendicularmente, distribuir o material por toda a superfície de maneira uniforme. 
3. Repetir o mesmo procedimento por 3 vezes, ou até que a superfície da placa esteja 
seca, alterando a direção da estria (vide figura abaixo).
 a) Inóculo Inicial        b) Espalhamento
Fonte: Levy, 2004.