Biomedicina

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49Biomedicina na prática: 
da teoria à bancada SUMÁRIO
Procedimento:
1. Preparar os seguintes tubos de ensaio, contendo:
Tubo 1: 3 mL de Seliwanoff + 5 gotas de água destilada.
Tubo 2: 3 mL de Seliwanoff + 5 gotas de frutose 2 %.
Tubo 3: 3 mL de Seliwanoff + 5 gotas de glicose 2 %.
Tubo 4: 3 mL de Seliwanoff + 5 gotas de sacarose 2 %.
2. Colocar em banho-maria fervente até completar a reação.
3. Observar de três em três minutos, durante aproximadamente 10 minutos. Explicar o 
que ocorre.
4. A mudança de cor para vermelho significa resultado positivo.
8.2. Identificação de açúcares redutores - Reação de Benedict
Utilizada para identificação de carboidratos redutores. Íons de metais como, cobre, 
prata, ferro, mercúrio etc., são reduzidos por grupos aldeídos ou cetônicos livres de vários 
carboidratos. Colocando-se hidróxido de cobre II, Cu (OH)2, de cor azul, em meio alcalino, 
forma-se uma suspensão que, sob aquecimento, se precipita como óxido de cobre II, CuO 
de cor preta. Mas se compostos redutores forem acrescentados à suspensão, o Cu (OH)2 é 
reduzido a Cu2O, que se precipita e cuja cor se situa entre o amarelo e o vermelho. As reações 
abaixo mostram o que ocorre o Cu (OH)2 na presença e na ausência de agentes redutores, em 
meio alcalino e a quente.
Ausência de composto redutor:
      Meio alcalino
Cu(OH)2   CuO + H2O
 (azul)   Aquecimento   (preto)
Presença de composto redutor:
      Meio Alcalino
Cu (OH)2   Cu2O + H2O
 (azul)   Aquecimento   (amarelo/vermelho) 
Como não é prático utilizar uma suspensão de Cu2+, e também para evitar que o CuO 
(preto) mascare o resultado da reação, acrescenta-se ao meio da reação um composto 
orgânico solubilizador que, em meio alcalino adequado, reage com os íons metálicos, 
formando um complexo iônico solúvel. Este complexo se dissocia em grau suficiente para que 
haja, no meio da reação, íons metálicos disponíveis para se reduzirem. No caso do reagente de 
Benedict (qualitativo), emprega-se CuSO4 2% solubilizado por citrato de Na+ 20%, dissolvidos 
em Na2CO3 2 M.
Os testes de carboidratos redutores são positivos para compostos com grupamento 
–OH glicosídico livre, mas negativos para polímeros de cadeias longas. Assim, amido não dá 
reação positiva, a não ser após a sua hidrólise, e a reação é tanto mais positiva quanto maior 
a extensão da hidrólise.
50Biomedicina na prática: 
da teoria à bancada SUMÁRIO
Procedimento:
1. Colocar em tubo de ensaio 2,0 mL do reagente de Benedict e 1,0 mL da amostra a ser 
analisada. 
2. Ferver durante 3 minutos em banho-maria. 
3. Anotar o resultado.
O aparecimento de um precipitado de coloração vermelho-tijolo indica que os íons Cu2+ 
do reagente de Benedict foram reduzidos a Cu+, indicando presença de açúcar redutor. Relatar 
a positividade da reação, em cruzes, de acordo com o aparecimento da cor final seguindo 
instrução a seguir:
Azul - 0
Verde - 1+
Amarelo - 2+
Laranja - 3+
Tijolo - 4+
Responder:
Por que houve variação na cor e nem todas as amostras apresentaram reação?
8.3. Detecção de polissacarídeos - Reação do Lugol
O reagente de lugol (5g de I2 + 10 g de KI em 100 mL de H2O) diluído 20 vezes com H2O 
dá, com o amido, um complexo de cor azul e com o glicogênio, um complexo de cor vermelha. 
A composição desses compostos não está definida. Celulose, mono e dissacarídeos não dão 
coloração com iodo.
Procedimento:
1. Preparar a seguinte série de tubos contendo:
Tubo 1: 1 mL de água
Tubo 2: 1 mL de glicose 2%
Tubo 3: 1 mL de sacarose 2%
Tubo 4: 1 mL de amido 2%
2. Acrescentar, a cada tubo, 2 gotas do reagente de lugol. Observar e explicar o ocorrido 
em cada tubo.
8.4. Dosagem de Carboidrato – Glicose
A glicose presente na amostra origina, segundo as reações descritas abaixo, um complexo 
colorido que se quantifica por espectrofotometria.
Glicose + ½ O2 + H2O glicose oxidase Glucônico + H2O
2 H2O + 4 – Aminoantipirina + Fenol peroxidase Quinonaimina + 4 H2O
O complexo corado (vermelho) apresenta absorbância proporcional à concentração de 
glicose na amostra analisada.