Biomedicina

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59Biomedicina na prática: 
da teoria à bancada SUMÁRIO
13.4. Teste de Liberação dos Ácidos Graxos
A adição de um ácido forte fornecerá prótons que irão forçar a liberação dos ácidos 
graxos sob a forma associada.
1. Pipetar em um tubo de ensaio 5 mL do sabão preparado anteriormente.
2. Adicionar, gota a gota, HCl concentrado. Observar e explicar.
13.5 Teste de Formação de Sabões Insolúveis
Os sabões de cálcio ou magnésio se dissociam muito pouco, e por este motivo os sabões 
destes metais alcalinos terrosos são insolúveis. Os sabões insolúveis são obtidos a partir de 
sabões solúveis pela adição de sais de cálcio ou magnésio.
1. Pipetar, em dois tubos de ensaio, 3 mL de sabão.
2. Adicionar, gota a gota, no tubo 1, a solução de CaCl2; no tubo 2 a solução de MgSO4.
Responda:
1. Comente o processo de saponificação, destacando os mecanismos químicos desta 
reação.
2. Explique de que forma ocorre a emulsão.
3. Onde se pode aplicar o processo de emulsificação nos organismos vivos.
13.6. Teste do Iodo
Este teste identifica a presença de ácido graxo insaturado. Ocorre uma reação de 
halogenação, em que o iodo reage com as duplas ligações do ácido graxo insaturado. 
Halogenação é a reação do ácido graxo insaturado com um halogênio, formando ácido graxo 
saturado halogenado.
Fonte: http://www.dbm.ufpb.br/DBM_bioquimica_monitoria.htm
Se houver dupla ligação, o iodo será consumido e a coloração característica da solução 
de iodo diminuirá de intensidade.
Procedimento:
Colocar num tubo de ensaio 1 mL de óleo vegetal, adicionar 3 gotas de lugol e aquecer 
direto na chama cautelosamente. Observar a mudança de coloração do sistema.
Responda:
1. Comente o processo de saponificação, destacando os mecanismos químicos desta 
reação.
60Biomedicina na prática: 
da teoria à bancada SUMÁRIO
2. Explique de que forma ocorre a emulsão. 
3. Onde se pode aplicar o processo de emulsificação nos organismos vivos.
4. Como ocorre o processo de eliminação da “sujeira” (gordura)? 
13.7. Detecção do Colesterol - Método de Salkowiski
O colesterol tem na sua estrutura o anel ciclopentanoperidro fenantreno, graficamente 
representado por quatro anéis fundidos. Embora apresente propriedades de solubilidade 
semelhante à dos lipídios, os esteroides como o colesterol apresentam estruturas e 
propriedades químicas diferentes e pode ser diferenciado por meio da reação de coloração. 
Neste método, ocorre a desidratação na insaturação formando um composto colorido.
Procedimento:
1. Identificar um tubo de ensaio;
2. Pipetar 1 mL da solução clorofórmica de colesterol e adicionar 1 mL de ácido sulfúrico 
concentrado cuidadosamente pela parede.
3. A reação é positiva quando há formação de composto vermelho amarronzado.
14. PRÁTICA: Oxidação e redução
Esta prática tem como objetivo a determinação da ocorrência das reações de oxidação e 
redução em compostos enzimáticos com a presença de NAD e NADH.
14.1. Determinação cinética de Alanina Aminotransferase (ALT) ou 
Transaminase Glutâmico Pirúvica (TGP)
Princípio de ação
Determinação cinética (UV) da ALT, segundo a reação:
              ALT
L - Alanina + a – Cetoglutarato → Piruvato + L – Glutamato
          LDH
Piruvato + NADH + H+ → L – Lactato + NAD+
A ALT catalisa a transferência do grupamento amina da Alanina para a - Cetoglutarato, 
formando Piruvato e Glutamato. O Piruvato em presença de LDH (lactato desidrogenase) reage 
com o NADH reduzindo-se a Lactato e o NADH oxida-se a NAD+. A velocidade de oxidação é 
proporcional à atividade da ALT na amostra.
Aplicação clínica
O aumento da atividade das enzimas Aspartato Amino Transferase - AST (de localização 
citomitocondrial) e, Alanina Amino Transferase - ALT (de origem citoplasmática) refletem 
alterações de vários tecidos. ALT - Maior atividade desta enzima está localizada no tecido 
hepático. Menores atividades ocorrem no músculo esquelético, coração, rins e pâncreas. Sua 
atividade encontra-se aumentada na hepatite viral e tóxica [30 - 50 ou 100 vezes os valores de 
referência (VR)] bem como em outras doenças hepáticas (DH), associadas à necrose hepática. 
Nas DH crônicas associadas à necrose celular devido ao aumento da liberação de AST -