MOIFOPA: Ovário Artificial para Foliculogênese

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MOIFOPA 
 Alternativa criada para entender o processo de 
 foliculogênese e fornecimento de milhares de 
 oócitos viáveis; a proposta consiste em resgatar 
 ou isolar os FOPA dos ovários antes da atresia, 
 cultivar os FOPA e os oócitos até a maturação 
 (criação de um ovário artificial); 
 Vantagens : ferramenta importante para estudar a 
 foliculogênese (efeito de diferentes substâncias 
 (gonadotrofinas, fatores intraovarianos) no 
 cultivo in vitro; cultivo in vitro de folículos 
 (CIVF) em ovário artificial; fornecimento de 
 milhares de oócitos viáveis (PIVE, ICSI e 
 clonagem); 
 ISOLAMENTO FOLICULAR: coleta e transporte exige 
 o acondicionamento e isolamento dos folículos 
 pré-antrais; remoção das estruturas não 
 desejadas (medula, folículos antrais, corpo lúteo e 
 corpus albicans); separação dos folículos dos 
 demais componentes do estroma (por meio de 
 técnicas mecânicas e/ou enzimáticas); 
 Métodos mecânicos como tissue chopper, mixer, 
 tesouras cirúrgicas; mais eficaz; e métodos enzimáticos 
 como a colagenase; 
 O método enzimático, em comparação ao método 
 mecânico é melhor, mas ainda é possível realizar as duas 
 alternativas (alta recuperação nos dois métodos); 
 O ovário bovino é picotado (por meio do tissue chopper), 
 e dissociação mecânica (pipeta de Pasteur em meio); após 
 isso é feita a filtração (500µm e 100µm), onde a suspensão 
 acontece quando está <100µm (o que sai é dejeto e o que 
 fica preso é folículo); é feita a contagem dos folículos 
 isolados, e são categorizados em primordial, primário e 
 secundário; 
 Cultivo in vitro dos folículos: permite o 
 desenvolvimento dos folículos e da granulosa, 
 que são bem variáveis; um dos maiores 
 problemas é a escolha dos substratos específicos 
 para cada fase (pois existem variações individuais 
 e entre espécies), escolha do meio rico, fonte 
 protéica, hormônios e fatores de crescimento; o 
 feeding deve ser realizado; 
 A evolução desejada consiste no desenvolvimento 
 do folículo primário para folículo antral até a 
 ovulação em placa de petri; 
 Utilização dos oócitos: podem ser selecionados para 
 realização de PIVE, ICSI ou clonagem; há baixa 
 taxa de sobrevivência para o processo de 
 criopreservação neste método, pois há uma 
 manipulação excessiva dos oocitos; a alternativa é 
 criopreservar em FOPA, tendo um oócito menor, 
 sem ZP, menor quantidade de células da 
 granulosa e baixa taxa metabólica; 
 Criopreservação de FOPA: quando há folículo incluso no 
 tecido ovariano ( in situ ), folículo isolado, ACP (DMSO, 
 EG); é um protocolo de congelação parecido com 
 embrião, tendo uma lenta controlada e vitrificação ; 
 O cultivo in vivo pode ser utilizado para transplante, 
 podendo ser realizado o autotransplante ortotópico / 
 heterotópico, alotransplante (indivíduos de mesma 
 espécie), e xenotransplante (espécies que podem ou não 
 ser semelhantes entre si);