Transcrição em eucariotos - Biologia molecular

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Transcrição em eucariotos
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O que é?
É a cópia do molde do DNA para se transformar em RNA. Esse processo irá
acontecer no núcleo. Quem vai executar essa transcrição é a RNA polimerase.
Estágios da transcrição
Iniciação: 
- O que vai ser transcrito é um fragmento de DNA chamado de 'gene';
- Ambas as fitas de DNA podem ser usadas para fazer a fita de RNA, mas a escolha
da fita molde dependerá da localização e orientação do promotor;
- Ele sempre vai utilizar como molde a fita 3'-5', pois deve gerar sempre uma fita 5'-3'
→ O sentido da fita molde na transcrição será no sentido 3'-5';
→ A enzima RNA polimerase tem que deslizar muito rapidamente sobre o DNA para
transcrevê-lo, e para isso, ela não trabalha sozinha. Ela terá a ajuda dos GTF's (Fatores
Gerais de Transcrição), que irão auxiliar indicar onde será o início da transcrição;
→Os TFIIX (Fatores de Transcrição) precisam chegar primeiro do que a RNA
polimerase, porque são eles que vão ajudar a identificar a região que precisa ser
transcrita.
Analogia: Quando lemos um livro, não nós lembramos de cada detalhe do que acontece,
apenas das principais partes que darão sentido para poder entender a continuidade da
história. Pegamos as partes mais importantes.
→ Esses fatores de transcrição chegam e se ligam a uma região promotora do DNA,
formando um complexo de iniciação apropriado antes que a RNA polimerase se ligue e
inicie a transcrição.
Origens da transcrição 
→ A TATA-binding protein liga-se à TATA-
box;
→ O TFIIB liga-se à TATA-protein e recruta
o completo TFIIF-RNA polimerase II;
→ O TFIIF liga-se à RNA polimerase II e ao
TFIIB e alinha a polimerase no promotor;
→ O TFIIE recruta o TFIIH que possui
atividade de helicase;
→ OTFIIH desenrola o DNA na região do
promotor e fosforila a RNA polimerasae,
ativando-a;
→ Após a síntese de um polinucleotídeo
(60-70pb), o TFIIH e o TFIIE se dissociam
no complexo.
→ O RNA é alongado pela ação de fatores
de alongamento e, após o tpermino da
transcrição, a RNA polimerase é
desfosforilada e inativada.
→ TATA box: É uma sequência de nucleotídeos (adeninas e timinas) que sinaliza a
RNA polimerase que é logo depois dali que a transcrição vai começar;
→ Além disso, vão ter "acentuadores" na região -75 que irão ajudar os fatores de
transcrição a chegar na TATA;
→ -25 é a região onde a TATAAA normalmente está localizado, onde os fatores de
transcrição vão se ligar;
→ O +1 indica que é ali que a transcrição começou, o que ficou antes desse +1 é
chamado de negativo, ficando -1, -2, -3…;
→ Os fatores de transcrição só participam do início, para sinalizar o local que a
transcrição vai iniciar. Após o começo da transcrição, só vai ficar o DNA e a RNA
polimerase;
→ Há um intervalo entre a região -25 (onde se localiza a TATA box) e a região +1
(início da transcrição), para poder dar tempo da RNA polimerase se ligar e se
acomodar, fazendo com que não haja a perda de nenhuma informação.
Transcrição em eucariotos
Fatores de transcrição
 - Os fatores de transcrição, aqueles que se ligam a TATA box para auxiliá-la como
sinalização para a RNA polimerase, estão divididos em subtipos. Estes são: TFIIA,
TFIIB, TFIID, TFIID, TFIIF, TFIIH, TFIIJ
TF (Fator de transcrição), II (polimerase II, a que forma o RNA mensageiro), letras
(pra diferenciar).
→ TBP: Proteína de ligação que auxilia os fatores de transcrição a se ligarem a TATA
box;
→ O primeiro fator de transcrição que se liga a TATA box (região promotora) é a
TFIID, logo após se liga a TFIIA e TFIIB;
→ O TFIIF se liga a RNA polimerase para que depois os dois se liguem a TATA box.
Esse fator contém 2 subunidades que ajudam a RNA polimerase a desenrolar a dupla
fita de DNA;
→ A TFIIH tem função de helicase;
→ RESUMINDO: Os fatores de transcrição se liga a TATA box, a enzima RNA
polimerase se liga, esses fatores ajudam a abrir o DNA formando uma bolha de
transcrição e, quando a transcrição começa a partir do ponto +1, os fatores de
transcrição vão embora e começa o alongamento, de estender o DNA para formar o
RNA.
Alongamento
→ Vai usar como molde a fita 3'-5' do DNA para formar a fita de RNA, pois a RNA
polimerase não consegue ler a fita de DNA de sentido 5'-3';
→ A RNA polimerase vai lendo e vai adicionando os pares de bases que são
complementares ao DNA. Quando aparecer A (adenina) no DNA, a polimerase irá colocar
U (uracila) na fita de RNA;
→ Para impedir que haja degradação das primeiras regiões da fita de RNA recém
formada por outras enzimas que estão na célula, então é acrescentado a Cap 5’
metilguanosina na ponta 5' do RNA, com a finalidade de conservar aquela região. Esta
cap 5’ é acrescentada quando a cadeia de RNA, em crescimento, tiver cerca de 30
nucleotídeos;
→ A medida que a RNA polimerase se move, a bolha de transcrição vai junto com ela; 
Término
→ É dado pela separação do DNA com o RNA recém formado;
→ Haverá uma sequência sinalizadora indicando que irá indicar que a transcrição está
chegando ao fim;
→ Vai aparecer sequências que irão enfraquecer ou desacelerar a RNA polimerase;
→ A primeira sequência que irá aparecer para a enzima ir desacelerando é AAUAAA,
mas a enzima ainda não irá se desligar totalmente da fita;
→ Mais pra frente ela irá ficar com uma região cheia de G e U;
→ Essa fita de RNA é linear, mas pode começar a se emparelhar com nucleotídeos
que a complementam;
→ Depois que se complementam e formam uma estrutura como uma espécie de
hélice, a RNA polimerase se dissocia do DNA e o RNA se solta do DNA;
→ E, para impedir que a fita no lado 3' seja degradada por enzimas presentes na
célula, é colocada uma sequência de adeninas no fim, conhecida como cauda poli A. 
Splicing 
→ Quando o RNA sai transcrito, ele é chamado de "pré RNA mensageiro (Pre-
mRNA)", indicando que ele não está maduro para formar proteínas;
→ Para ele estar pronto, precisa que as partes que não codificam aminoácidos, os
introns, sejam retirados e as partes capaz de codificar aminoácidos, os exons, fiquem;
→ Um intron iniciacom uma sequência 5'GU e termina com uma sequência 3'AG;-
→ O spliceossomo é um complexo de proteínas e pequenos RNAs nucleares (snRNA)
que se unem para retirar os introns e unir os exons, deixando o RNA pronto para ser
lido;
→ Eles se unem, retiram os introns, juntam os exons e se retiram;
→ A junção de um exon a outro é dada pela RNA ligase;
→ Após isso vão em direção ao citoplasma, passando pelo poro nuclear.
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